Kiss-1及Smad1在结直肠癌及腺瘤组织中的表达及临床意义

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ktcalf
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目的:结直肠癌是严重危害人类生命健康的常见消化系统恶性肿瘤,无论是在世界范围内还是中国,其发病率及死亡率均位于前列。结直肠癌的发生是一个包括多因素、多途径的非常复杂的过程,由多个癌基因和抑癌基因参与调节。扩散和转移是恶性肿瘤的生物学特征之一,严重影响患者生存质量并危及生命。因此,研究结直肠癌的形成,控制转移和扩散是降低结直肠癌的发生、延缓癌症进展以及改善患者预后的关键。目前,抑癌基因和转移抑制基因对肿瘤的发生和预后影响成为研究的热点。因此,本研究选取抑癌基因Smad1及转移抑制基因Kiss-1为研究指标,采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法检测两者在结直肠癌组织、癌旁正常组织及结直肠腺瘤组织中的表达情况,并分析其临床意义。方法:1结直肠癌组织和正常对照组织来源于2010年1月至2013年1月期间我院普外科行手术切除的49例结直肠癌患者(术前均未接受放疗、化疗),其中男性25例,女性24例,平均年龄62.57±11.20岁。结直肠腺瘤组织来源于同期我院内镜中心行内镜切除的32例患者,其中男性19例,女性13例,平均年龄58.16±11.03岁。各组患者的年龄和性别匹配(均P>0.05)。全部研究对象均经我院病理科两位主任医师独立作出诊断,诊断一致者纳入研究范围。分组情况:结直肠癌组49例(手术切除的肿瘤组织);正常对照组49例(为距肿瘤组织边缘5cm以上的结直肠正常黏膜);结直肠腺瘤组32例(为结肠镜下切除的直径≥1cm的腺瘤组织)。结直肠癌依据临床病理特征分组:结肠癌23例,直肠癌26例;低分化腺癌7例,中高分化腺癌42例;TNM分期I+II期29例,III+IV期20例;无淋巴结转移者31例,有淋巴结转移者18例。2常规组织学处理所有标本均经10%福尔马林溶液固定,常规石蜡包埋切片,HE染色供病理学观察。肿瘤组织学分级根据是美国联合癌症委员会(AJCC)/国际抗癌联盟(UICC)制订的结直肠癌TNM分期系统。3免疫组织化学检测石蜡包埋组织以3.5um~4um厚度连续切片,烤箱60℃~65℃过夜,常规脱蜡,柠檬酸修复液煮沸修复,采用SP免疫组化法染色,严格按照免疫组化试剂盒说明书步骤进行,DAB显色,苏木素复染,以已知Kiss-1蛋白/Smad1蛋白阳性切片作阳性对照,以PBS液代替一抗作阴性对照。4结果判定采用双盲法显微镜下观察结果。Kiss-1蛋白/Smad1蛋白为细胞胞质染色,胞质棕黄色为阳性,不着色为阴性。阳性判定以阳性细胞数及染色强度综合判定。5统计学方法应用SPSS软件16.0,采用c2检验进行统计分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1 Kiss-1蛋白表达组间比较1.1 Kiss-1蛋白在结直肠癌细胞胞质呈淡黄色,弱阳性表达;Kiss-1蛋白在结直肠腺瘤细胞胞质中呈黄色,阳性表达;Kiss-1蛋白在结直肠正常黏膜细胞胞质中呈棕黄色,强阳性表达。Kiss-1蛋白在结直肠癌组、结直肠腺瘤组与正常对照组中的阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)。1.2组间两两比较情况:Kiss-1蛋白表达在结直肠癌组显著低于结直肠腺瘤组及正常对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);Kiss-1蛋白表达在结直肠腺瘤组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。1.3结直肠癌中Kiss-1的表达与临床病理特征之间的关系结直肠癌组中Kiss-1的表达与患者与淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05),其阳性表达在无淋巴结转移患者明显高于有淋巴结转移患者,在临床I+II期患者明显高于III+IV期患者;而与患者性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大小、分化程度、组织学类型、浸润情况无明显相关(P>0.05)。2 Smad1蛋白表达组间比较2.1 Smad1蛋白在结直肠癌细胞胞质呈淡黄色,弱阳性表达;Smad1蛋白在结直肠腺瘤细胞胞质中呈黄色,阳性表达;Smad1蛋白在结直肠正常黏膜细胞胞质中呈棕黄色,强阳性表达。Smad1蛋白在结直肠癌组、结直肠腺瘤组与正常对照组中的阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)。2.2组间两两比较情况:Smad1蛋白表达在结直肠癌组显著低于结直肠腺瘤组及正常对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);Kiss-1蛋白表达在结直肠腺瘤组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。2.3结直肠癌中Smad1的表达与临床病理特征之间的关系结直肠癌组中Smad1的表达与患者性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大小、分化程度、组织学类型、浸润情况、淋巴结转移、TNM分期均无明显相关(P>0.05)。结论:1结直肠癌组中Kiss-1蛋白表达显著低于腺瘤或正常对照组,提示Kiss-1蛋白在结直肠癌发生过程中下调,起抑癌作用。2将结直肠癌按照临床病理特征进行分组,Kiss-1蛋白在无淋巴结转移组显著高于有淋巴结转移组,在TNM分期中的I期+II期组显著高于III期+IV期组,提示Kiss-1蛋白在结直肠癌发展过程中起到抑制肿瘤转移的作用,其表达下调对临床制订个体化治疗方案和判断预后有一定的指导意义。3结直肠癌组织中Smad1蛋白表达显著低于腺瘤或正常对照组,提示Smad1蛋白在结直肠正常上皮恶性转化过程中下调,Smad1基因在结直肠癌的发病进程中起到类似于抑癌基因的作用。4 Kiss-1蛋白和Smad1蛋白表达在结直肠腺瘤组与正常对照组无差异,提示Kiss-1蛋白及Smad1蛋白异常改变是结直肠癌的非早期事件。
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