重组人类脑源性神经营养因子在原核融合蛋白表达系统中的表达和纯化

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近年来的研究显示,脑源性神经营养因子(BDNF)是神经营养因子家族中的一个重要成员.在中枢神经系统中,它具有广泛的分布、精确的表达和反应调节系统、灵活的作用方式和多样的功能,所以对BDNR的研究将有助于研究人员进一步理解神经系统的发生、发育、神经损伤的修复和神经元的相互联系和功能调控,从而为治疗某些神经系统疾病奠定基础.为此研制重组人类BDNF在基础和临床研究领域都具有极其重要的意义.在以往获得人类BDNF全长cDNA的成果基础上,研究人员运用原核细胞GST融合蛋白表达系统,构建了BDNF的表达质粒pGEX-2T-BDNRCA,并用限制性内切酶消化和测序予以证实.此后研究人员在宿主菌DH-5α大肠杆菌菌株中进行了诱导.SDS-PAGE和Western印迹杂交证实,有融合蛋白GST-BDNF的表达.最后研究人员利用盐酸胍法和十二烷基肌酸钠法处理诱导表达过程中出现的包含体,并利用GST-融合蛋白纯化试剂盒对表达产物进行了初步纯化.
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