A组人轮状病毒VP3基因克隆及重组表达

来源 :北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hytsxz
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轮状病毒(rotavirus,RV)属于呼肠病毒科(Reoviridae)轮状病毒属(Rotavirus),是引起婴幼儿严重胃肠炎的主要病原体,每年全球因RV感染所导致的重症腹泻而死亡的儿童约600000。RV是直径约为70nm,无包膜,由3层衣壳蛋白组成的正二十面体双链RNA病毒。RV基因组包含11个分节段的双链RNA,编码6个结构蛋白(VP1-VP4, VP6, VP7)和6个非结构蛋白(NSP1-NSP6)。根据结构蛋白VP6的抗原性差异,可将已发现的RV分为A-G7个组,其中,A组为引起婴幼儿腹泻的主要病原。RV结构蛋白VP3在病毒基因转录过程中发挥着重要的功能。本研究运用基因克隆和重组表达技术,构建了携带A组人RV TB-Chen株VP3蛋白完整编码基因的重组表达质粒,在大肠杆菌中表达重组VP3蛋白(rVP3),对A组RV VP3进行了系统进化和基因分型研究。结果表明,rVP3可在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中表达;表达的完整rVP3在菌体中以包涵体形式存在;rVP3可以被抗SA1l株RV全病毒蛋白的豚鼠血清抗体识别;至今发现的A组RVVP3至少可以分为7个不同的基因型(M1-M7),其中人类中有3个型(M1-M3),M4和M7型仅在鸟类中发现,TB-Chen株的VP3基因属于M2型;不同VP3基因型有独特的敏感宿主范围,同一基因型可能感染不同种动物,同一种动物也可能感染不同基因型。研究结果为大量制备RV VP3蛋白及进一步研究其结构功能提供了重要基础。
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