一、研究背景与目的 植入体内的或与人体血液接触的生物材料及制品应用于临床的前提和基础是必须检测其生物安全性,即材料的生物相容性。根据国际标准化组织ISO10993-1:1992医疗器械生物学评价标准和要求,就本单位与浙江大学高分子材料所共同研制的一种新型生物人工肝材料——聚合物杂化界面聚丙烯膜,即丙稀酰胺接枝改性聚丙烯膜(PP-g-AAm),我们进行了一系列体外生物学实验研究,旨在对该材料进行有效的细胞毒理学、全身急性毒性试验、血液相容性、免疫相容性等生物相容性评价,从而为该材料的临床应用奠定基础。 二、方法 1.制备PP-g-AAm膜材料及材料浸提液 将聚丙烯(PP)薄膜剪成2×5cm大小,浸入30%过氧化氢溶液中,于紫外光(波长254nm,强度5000μW/cm,距离20cm)下氧化4h。然后浸于盛有10ml 5%丙烯酰胺(AAm)溶液中,除氧充氮。注入1ml(0.015mol/L)的硫酸亚铁胺溶液,引发AAm在PP膜表面的接枝聚合。聚合反应在30℃下进行30min,得到表面接枝丙烯酰胺的聚丙烯膜(PP-g-AAm),并测量材料表面的亲水性。制备浸提液,按介质(细胞毒性试验用RPIM-1640培养基,体内急性毒性实验及溶血实验用生理盐水):试样表面积(cm~2)=10∶6,浸提条件为37℃、72h±2h。 2.细胞毒理学实验 将对数生长期的L929细胞制备成10种不同浓度的细胞悬液,根据其生长情况建立本实验室的L929细胞生长代谢标准曲线。根据上述曲线确定接种细胞数为6000个