慢性间歇性缺氧对大鼠局灶性脑缺血再灌后神经细胞凋亡的影响

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目的:观察慢性间歇性缺氧对大鼠脑缺血再灌注后脑梗死体积、神经元形态结构、细胞凋亡、Bcl-2、Bax表达的变化,探讨其对大鼠脑缺血再灌注后可能的神经损害作用机制。方法:58只健康雄性SD大鼠随机选取10只大鼠进行CIH预实验,每只大鼠缺氧前后均查血气分析,以判断是否达到低氧血症及低氧的程度。造模成功后,随机分为5组,正常对照组、假手术组、缺血再灌24小时组、CIH4周+缺血再灌24小时组、CIH8周+缺血再灌24小时组,缺血组和CIH合并缺血组又分别分为测体积组及免疫组化组,每组6只。分别用光镜观察受损组织细胞的形态学改变,免疫组织化学染色法检测Bcl-2和Bax蛋白表达水平,TUNEL法检测细胞凋亡情况,TTC染色检测梗死体积,利用神经功能缺损评分评价神经功能缺损情况。结果:大鼠TTC染色示CIH8周+缺血再灌注组的梗死体积及神经功能缺损评分大于其余两组(P<0.05)。CIH4周+缺血再灌注24小时组与缺血再灌组比较无显著差异(P﹥0.05)。TUNEL染色阳性细胞主要分布在坏死灶的周边和皮质区。CIH8周+缺血再灌注组的细胞凋亡数大于其余两组(P<0.01)。CIH4周+缺血再灌注组与缺血再灌组比较无显著差异(P﹥0.05)。CIH8周+缺血再灌组Bcl-2蛋白表达减低(P<0.01),Bax蛋白表达增强(P<0.05),Bcl-2/Bax比值减低(P<0.05)。CIH4周+缺血再灌组Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值比缺血再灌组减低(P<0.01)。然而,CIH4周+缺血再灌组Bax蛋白表达与缺血再灌组比较差异无显著意义(P﹥0.05),CIH8周+缺血再灌注24小时组Bcl-2、Bax蛋白表达Bcl-2/Bax比值与CIH4周+缺血再灌24小时组比较无显著差异(P﹥0.05)。结论:⑴CIH可以增加脑缺血再灌后大鼠神经功能缺损、梗死体积。⑵随着CIH时间延长,可使大鼠脑缺血后缺血半暗带的细胞凋亡增加、Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白的表达下调、Bcl-2/Bax表达的比值减小,Bcl-2/Bax的变化可能参与了CIH对脑缺血后细胞凋亡过程的调控。
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