敲低MSX2基因表达对胰腺癌PANC1细胞上皮—间质转化的影响及其机制研究

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目的:探究MSX2与胰腺癌PANC1细胞EMT(Epithelial-Mesenchymal Transitions)发生的关系,并初步研究其机制方法:1.通过RNA干扰的方法敲低胰腺癌PANC1细胞中的MSX2表达,并用q RT-PCR及Western-blot检测干扰效率,选取干扰效率最高的一组用于后续试验2.观察干扰前后胰腺癌细胞发生的形态学变化3.通过q RT-PCR和western-blot试验检测干扰前后胰腺癌细胞中EMT标志分子E-钙粘蛋白和波形蛋白在基因和蛋白水平的表达变化4.通过划痕、transwell和CCK-8试验检测干扰前后胰腺癌细胞的侵袭转移能力、增殖能力的变化5.通过RT-PCR试验检测干扰前后胰腺癌细胞中EMT相关转录因子snail、slug、twist、zeb1的表达变化,进而初步探索MSX2对胰腺癌PANC-1细胞EMT发生作用的分子机制结果:1.干扰MSX2后,PANC1细胞由长梭形变成连接紧密的椭圆形2.干扰后E-cadherin在基因和蛋白水平的表达量均发生上调,而vimentin表达则下降(P<0.05),细胞发生了MET(mesenchymal-epithelial transition)转变3.干扰MSX2基因后PANC1细胞侵袭转移能力降低,增殖能力受到抑制4.干扰MSX2后引起snail和twist基因表达明显低于对照组(P<0.05),推测其可能是MSX2促进PANC1发生EMT的靶基因结论:1.敲低胰腺癌PANC1细胞的MSX2基因表达可抑制EMT的发生,并且细胞的侵袭转移、增殖能力降低2.MSX2在胰腺癌中高表达,并且与癌细胞的恶性表型密切相关,具有做为诊断及治疗的潜在作用
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