肝癌是世界第六大最常见的癌症。近年来肝癌的患病率和死亡率仍在上升,2018年全球约有78.2万肝癌患者死亡,约占癌症相关死亡率的8.2%。表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)作为一个受体酪氨酸激酶的跨膜蛋白,激活后影响各类调控生长、增殖、分化和生存的信号通路。EGFR信号通路在急、慢性肝损伤后的肝再生、肝硬化和肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)中均发挥重要作用。RNFT2(RING Finger Protein,Transmembrane 2,RNFT2)是一个含有RING结构域的跨膜蛋白。由于该结构域是一个典型的E3泛素连接酶相关结构域,我们推测其可能具有潜在E3泛素连接酶的活性。但截止目前,该蛋白的功能鲜有报道。根据大数据调研,我们发现RNFT2在HCC中呈现出高表达的趋势,且表达量高的HCC患者往往预后较差。我们推测RNFT2可能对肝癌细胞的生长有一定的作用。通过MTT、软琼脂克隆形成和transwell迁移实验,我们发现过表达RNFT2能够促进肝癌细胞的生长、增殖和迁移,而敲低或敲除RNFT2能抑制相关过程。在前期酵母双杂交的实验中,我们发现RNFT2与磷脂转运酶1(Phospholipid Scramblase 1,PLSCR1)之间存在相互作用。PLSCR1不仅能与激活的EGFR受体发生相互作用,也能在质膜和内含体中快速穿梭循环。这暗示着RNFT2和EGFR确实存在一定的联系。HCC作为一种恶性肿瘤,在其发生发展过程中会出现细胞的异常增殖和EGFR信号通路的紊乱等。随后,我们探索了RNFT2在促进肝癌细胞增殖和迁移过程中的可能机制。我们发现过表达RNFT2能促进EGF刺激的EGFR通路的激活,而敲低或敲除RNFT2能明显抑制该过程。泛素化实验表明,RNFT2能够增加EGFR的泛素化,且RNFT2的RING结构域中的C387位可能是发挥功能的重要位点。通过共聚焦荧光实验,我们发现RNFT2还能通过影响EGFR的内吞来调控EGFR转运。综上所述,RNFT2作为一个含RING结构域鲜有报道的跨膜蛋白,能影响EGFR泛素化和EGFR信号通路且促进肝癌细胞的生长、增殖和迁移。含RING结构域的E3泛素连接酶异常表达也会促进多种恶性疾病的发生,如HCC。本论文探索和发现了含有RING结构域的新分子RNFT2的功能和作用机制,同时在一定程度上为HCC新靶点的探索提供新的思路和维度。