用二维液相色谱-质谱(LC/LC-MS)进行K562和K562/ADM细胞系的蛋白质组学研究

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本研究建立LC/LC-MS方法,分别对多药耐药细胞系K562/ADM和敏感细胞系K562蛋白质组进行分离与鉴定,通过分析2个细胞系中蛋白质种类及数量的改变,筛选可能产生肿瘤细胞MDR的相关蛋白质,以期寻求具有潜在临床应用前景的肿瘤多药耐药的鉴定方法,并指导临床合理选择抗肿瘤药物和化疗方案,提高白血病的治疗疗效。 利用二维高效液相色谱(HPLC)与质谱联用技术,分离与鉴定K562/ADM多药耐药细胞系和K562敏感细胞系蛋白质样品。HPLC分离模式中一维分离模式采用离子交换色谱(IEC),第二维液相分离系统采用反相色谱(RPLC)。结论采用二维高效液相色谱和电喷雾串联质谱技术,建立IEC-RPLC-MS/MS技术平台,可较好地实现K562/ADM和K562两个细胞系蛋白质组的分离与鉴定。与K562敏感细胞系相比,K562/ADM耐药细胞系有明显的差异性蛋白质表达,推测肿瘤细胞产生多药耐药性与细胞内多种差异蛋白相关。其中找到20种有明显差异的蛋白,有待于在今后的实验中予以验证。
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