与传统剂型相比较,多肽和蛋白质类药物控释微球具有较高的生物利用度,较小的副作用以及可减少患者痛苦和不便的优点,因此该类微球的制备成为近年的研究热点.本论文的目的在于开发一种新的以乙酸乙酯为有机溶剂的W/O/W复乳法,制备具有高蛋白质包埋率、高蛋白质生物活性保留、以及蛋白质释放速度稳定的控释微球,并对制备过程中各变量对微球特征的影响规律进行研究.本论文分为三个部分.第一部分合成及表征了一系列用来制备微球的膜材料,即单甲氧基聚乙二醇-聚-DL-乳酸共聚物(PELA).第二部分为W/O/W复乳化-分步固化法的建立.其中一个重要发现是有机溶剂的去除速度决定被包埋血红蛋白(BHb,模型蛋白)的活性,由此初步确立了能保持BHb活性的微包埋方法,即以乙酸乙酯为有机溶剂的W/O/W复乳化-溶剂扩散法.为了进一步降低微球粒径同时提高微球的产率,首次尝试了分步扩散去除乙酸乙酯的方法,有效地抑制了由于乙酸乙酯扩散速度过快而导致PELA易形成沉淀的趋势,建立了以乙酸乙酯为有机溶剂的W/O/W复乳化-分步固化法.该法可分为五步:①初乳化(W<,1>/O),②复乳化(W<,1>/O/W<,2>),③预固化,④固化,⑤纯化.第三部分为低蛋白质突释效应控释微球的制备及表征.以溶菌酶为模型蛋白,重点研究了分步固化法中各主要工艺变量对微球的粒径、表面形貌和蛋白质释放行为的影响.结果表明,以含MPEG2000嵌段,分子量为40000 dalton的共聚物PELA为膜材,采用该法制备微球,对溶菌酶的包埋率可保持在95％以上,在测试的100天内释放出的溶菌酶可保持天然活性.在分步固化法制备微球过程中,乙酸乙酯的去除速度决定微球的内部形态,从而决定微球的蛋白质释放行为.体积平均粒径为9.5μm的微球,突释效应为8％,随后的蛋白质释放速度稳定.当微球粒径降低至1μm时,突释效应为66％.研究表明,这种新型的以乙酸乙酯为有机溶剂的W/O/W复乳化-分步固化法是一种有应用前景的包埋药用多肽或蛋白质制备控释微球的技术.