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粗饲料是反刍动物不可或缺的营养来源，本研究比较了苜蓿干草和稻草饲喂对湖羊采食量等的影响和饲喂效果，初步探讨了胰岛素对微生物肠道菌群的影响。研究包括以下两个部分:
1苜蓿干草和稻草对湖羊生产性能、血液生化指标及相关激素分泌等的影响
试验选取12只体重相近的健康成年雄性湖羊(43±3kg，mean±SEKg)，随机分为苜蓿干草和稻草2个处理组，苜蓿干草组(精料+苜蓿干草)，稻草组(精料+稻草)。每天饲喂两次(早8:00、晚17:00)，同时记录羊舍的温度、湿度及采食量。试验的第0d、7d、14d、21d和28d，颈静脉采血，取血清用于血液生化指标、酶指标及相关激素水平指标的检测，试验0d，28d称重。饲喂4周后，宰杀全部试验羊，取各组织样品进行如下试验:1)测定各胃内容物中pH值及瘤胃中纤维素酶的活性;2)测定血液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、葡萄糖(GLU)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG)等生化指标;3)测定血液中胰岛索(INS)、皮质醇(COR)和甲状腺激素(T4)及瘦素(LEP)、胆囊收缩素(CCK)的含量;4)测定十二脂肠内容物中胰蛋白酶、胰淀粉酶活性及肠道黏膜组织中分泌型免疫球蛋白(sIgA)的含量;5)制作组织切片，观察胰腺、肝脏和脾脏的组织学变化。6)RT-PCR检测胰腺中胰蛋白酶原、胰淀粉酶和瘦素OB-R受体的mRNA的表达。
结果:1)用稻草完全替代苜蓿干草饲喂湖羊28d后，稻草组湖羊的平均日、周干物质采食量都低于苜蓿干草组，各组试验羊的平均体重与试验前相比较均有增长，苜蓿干草组体重增长率为14.3％，而稻草组为9.6％。2)各组试验羊瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃pH均在正常范围内，但稻草组瘤胃内容物多于苜蓿干草组。3)两组试验羊脾脏和胸腺指数无显著性变化，苜蓿干草组的胰脏和肝脏指数略高于稻草组。4)稻草组、苜蓿干草组羊瘤胃中液相和固相羧甲基纤维素酶活力没有显著差异，但稻草组的木聚糖酶和果胶酶活力显著性高于苜蓿干草组5)血液中生化指标结果显示:稻草试验组湖羊血清中AST、ALP、ALT显著降低(P＜0.05)，AST/ALT显著升高(P＜0.05)，而GLU、LDH、TG的含量均无显著性差异。6)稻草组血液中INS、CCK含量显著低于苜蓿干草组，LEP的含量显著性高于苜蓿干草组，T4和COR含量无差异变化。7)两组试验羊十二指肠、空肠、回肠黏膜中sIgA的含量无显著性变化。胰腺、肝脏和脾脏组织学结果显示均无异常变化。8)稻草组试验羊十二指肠内容物中胰蛋白酶、胰淀粉酶活性和胰腺中胰蛋白酶原及胰淀粉酶mRNA的表达均显著低于苜蓿干草组(P＜0.05)。与苜蓿干草组相比，稻草组羊胰腺组织中的OB-R基因的mRNA的相对表达量显著性上调(P＜0.05)。结果提示，饲喂不同碳水化合物粗料苜蓿和稻秸，对湖羊的生长性能、血液生化、酶等指标均无显著影响，但采食量及体增重有一定差异。LEP和CCK等调节食欲的激素分泌变化可能与稻草饲喂时羊的食欲下降有关，相关机理有待进一步研究。
2胰岛素对羊粪细菌区系的影响
为了分析INS与肠道细菌区系的互作影响，清晨在未进食的情况下用直肠按摩无菌采集3只崂山雄性羊(2岁，未作任何处理)的混合粪便，用不同浓度梯度INS(37.6、188、376 pM)进行羊粪菌群体外37℃厌氧培养，同时设空白对照组(对照组Ⅰ，ControlⅠ)和等量的二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)对照组(对照组Ⅱ，ControlⅡ)。培养8h后，测定对照组Ⅰ和对照组Ⅱ培养液OD630、短链脂肪酸(SCFAs)组成含量及大肠杆菌、乳酸菌、拟杆菌的相对含量。结果1)q-PCR检测结果，两对照组间无显著差异，说明每87mL培养体系中含有的109μLDMSO对粪便微生物区系没有产生影响。2)各INS处理组OD630均显著低于ControlⅡ组(P＜0.05)，其中376pMINS组显著低于其它各组(P＜0.05)。3)376pMINS处理组乙酸、丙酸、丁酸、异戊酸及总酸的含量显著低于ControlⅡ组(P＜0.01)，但是乙酸/丙酸与ControlⅡ组相比没有显著性变化。说明，376pMINS影响SCFAs的含量，但是不影响细菌区系的代谢类型。4)粪便培养液中拟杆菌、乳酸菌的q-PCR结果显示，188和376pMINS处理组的细菌数均显著高于ControlⅡ组(P＜0.05)，而大肠杆菌的q-PCR结果显示，INS处理组与ControlⅡ组无显著性差异。乳酸菌与大肠杆菌的q-PCR比值结果显示:188和376pMINS组的细菌数均显著高于ControlⅡ组(P＜0.05)。说明，中浓度和高浓度的胰岛素会促进类似于拟杆菌和乳酸菌等有益菌增长。结论:胰岛素可以影响粪便区系的组成，且这种作用随胰岛素的浓度增加而增加，但是不能改变细菌区系的代谢类型。
1苜蓿干草和稻草对湖羊生产性能、血液生化指标及相关激素分泌等的影响
试验选取12只体重相近的健康成年雄性湖羊(43±3kg，mean±SEKg)，随机分为苜蓿干草和稻草2个处理组，苜蓿干草组(精料+苜蓿干草)，稻草组(精料+稻草)。每天饲喂两次(早8:00、晚17:00)，同时记录羊舍的温度、湿度及采食量。试验的第0d、7d、14d、21d和28d，颈静脉采血，取血清用于血液生化指标、酶指标及相关激素水平指标的检测，试验0d，28d称重。饲喂4周后，宰杀全部试验羊，取各组织样品进行如下试验:1)测定各胃内容物中pH值及瘤胃中纤维素酶的活性;2)测定血液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、葡萄糖(GLU)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG)等生化指标;3)测定血液中胰岛索(INS)、皮质醇(COR)和甲状腺激素(T4)及瘦素(LEP)、胆囊收缩素(CCK)的含量;4)测定十二脂肠内容物中胰蛋白酶、胰淀粉酶活性及肠道黏膜组织中分泌型免疫球蛋白(sIgA)的含量;5)制作组织切片，观察胰腺、肝脏和脾脏的组织学变化。6)RT-PCR检测胰腺中胰蛋白酶原、胰淀粉酶和瘦素OB-R受体的mRNA的表达。
结果:1)用稻草完全替代苜蓿干草饲喂湖羊28d后，稻草组湖羊的平均日、周干物质采食量都低于苜蓿干草组，各组试验羊的平均体重与试验前相比较均有增长，苜蓿干草组体重增长率为14.3％，而稻草组为9.6％。2)各组试验羊瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃pH均在正常范围内，但稻草组瘤胃内容物多于苜蓿干草组。3)两组试验羊脾脏和胸腺指数无显著性变化，苜蓿干草组的胰脏和肝脏指数略高于稻草组。4)稻草组、苜蓿干草组羊瘤胃中液相和固相羧甲基纤维素酶活力没有显著差异，但稻草组的木聚糖酶和果胶酶活力显著性高于苜蓿干草组5)血液中生化指标结果显示:稻草试验组湖羊血清中AST、ALP、ALT显著降低(P＜0.05)，AST/ALT显著升高(P＜0.05)，而GLU、LDH、TG的含量均无显著性差异。6)稻草组血液中INS、CCK含量显著低于苜蓿干草组，LEP的含量显著性高于苜蓿干草组，T4和COR含量无差异变化。7)两组试验羊十二指肠、空肠、回肠黏膜中sIgA的含量无显著性变化。胰腺、肝脏和脾脏组织学结果显示均无异常变化。8)稻草组试验羊十二指肠内容物中胰蛋白酶、胰淀粉酶活性和胰腺中胰蛋白酶原及胰淀粉酶mRNA的表达均显著低于苜蓿干草组(P＜0.05)。与苜蓿干草组相比，稻草组羊胰腺组织中的OB-R基因的mRNA的相对表达量显著性上调(P＜0.05)。结果提示，饲喂不同碳水化合物粗料苜蓿和稻秸，对湖羊的生长性能、血液生化、酶等指标均无显著影响，但采食量及体增重有一定差异。LEP和CCK等调节食欲的激素分泌变化可能与稻草饲喂时羊的食欲下降有关，相关机理有待进一步研究。
2胰岛素对羊粪细菌区系的影响
为了分析INS与肠道细菌区系的互作影响，清晨在未进食的情况下用直肠按摩无菌采集3只崂山雄性羊(2岁，未作任何处理)的混合粪便，用不同浓度梯度INS(37.6、188、376 pM)进行羊粪菌群体外37℃厌氧培养，同时设空白对照组(对照组Ⅰ，ControlⅠ)和等量的二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)对照组(对照组Ⅱ，ControlⅡ)。培养8h后，测定对照组Ⅰ和对照组Ⅱ培养液OD630、短链脂肪酸(SCFAs)组成含量及大肠杆菌、乳酸菌、拟杆菌的相对含量。结果1)q-PCR检测结果，两对照组间无显著差异，说明每87mL培养体系中含有的109μLDMSO对粪便微生物区系没有产生影响。2)各INS处理组OD630均显著低于ControlⅡ组(P＜0.05)，其中376pMINS组显著低于其它各组(P＜0.05)。3)376pMINS处理组乙酸、丙酸、丁酸、异戊酸及总酸的含量显著低于ControlⅡ组(P＜0.01)，但是乙酸/丙酸与ControlⅡ组相比没有显著性变化。说明，376pMINS影响SCFAs的含量，但是不影响细菌区系的代谢类型。4)粪便培养液中拟杆菌、乳酸菌的q-PCR结果显示，188和376pMINS处理组的细菌数均显著高于ControlⅡ组(P＜0.05)，而大肠杆菌的q-PCR结果显示，INS处理组与ControlⅡ组无显著性差异。乳酸菌与大肠杆菌的q-PCR比值结果显示:188和376pMINS组的细菌数均显著高于ControlⅡ组(P＜0.05)。说明，中浓度和高浓度的胰岛素会促进类似于拟杆菌和乳酸菌等有益菌增长。结论:胰岛素可以影响粪便区系的组成，且这种作用随胰岛素的浓度增加而增加，但是不能改变细菌区系的代谢类型。