一种潜在的鱼类模型动物与内分泌干扰物生物毒性测试研究

来源 :中国科学院水生生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nemosan
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采用生物测试的方法对环境中大量存在的内分泌干扰物进行毒性评价,以确定其潜在的生态风险,是当前生态毒理学领域的研究重点.在水生态毒理研究中,发展基于鱼类的离体或活体测试方法为大多数研究者所接受.因此,选定合适的鱼类作为模型动物,并进行合理的实验室饲养管理,研究其基本的毒理学测试条件,最终才能建立起基于敏感生物效应标志的有效测试方法.目前我国还没有真正建立起标准的毒理实验鱼类模型.本文将业已进入小批量生产的国产小型鲤科鱼类"稀有鮈鲫"与国际标准鱼类测试模型青鳉进行了初步的毒理学比较研究,探讨了稀有鮈鲫用作内分泌干扰物筛选与测试研究的可行性;同时对青鳉进行了有机氯杀虫剂三氯杀螨醇的发育和繁殖毒性测试.根据稀有鮈鲫和青鳉的生物学特点建立了实验室模型鱼类的规范培育与质量控制技术,为进行毒理测试奠定了基础.在此过程中发现,以往培育稀有鮈鲫所用的活饵料水丝蚓不宜作为毒理实验鱼的常规饵料,因为它具有内分泌干扰效应.对稀有鮈鲫和青鳉的VTG蛋白和基因表达的初步研究发现稀有鮈鲫的VTG由两个亚基组成,分子量分别为170和147kDa;青鳉的VTG的分子量为206 kDa.通过设计简并引物,利用RT-PCR分别获得两种鱼类VTG的部分cDNA序列片段,分别为357和501个碱基对,与一些鱼类VTG的同源性很高.稀有鮈鲫和青鳉对雌激素响应的活体敏感性比较显示,稀有鮈鲫对人工合成的雌激素乙炔雌二醇高度敏感,大约为青鳉的10倍以上,而且高浓度的乙炔雌二醇对稀有鮈鲫具有严重的肾脏毒性.本文建立两种鱼类的肝细胞原代培养方法,其中青鳉的肝细胞原代培养更为简易.利用原代肝细胞所进行的离体测试表明青鳉原代肝细胞对TCDD应激的敏感性高于稀有鮈鲫.利用d-rR品系青鳉进行内分泌干扰化合物的发育和繁殖测试显得十分便捷,因为其雌雄性别从外表上即可区分.有机氯杀虫剂三氯杀螨醇对青鳉的发育和繁殖影响主要表现为在高浓度下增加肝指数、延缓幼鱼的生长发育、诱导雄鱼VTG生成和降低受精率;三氯杀螨醇虽然明显阻滞雌鱼性腺发育,但不影响成年雌鱼的生殖力.
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