微生态稳定菌群的构建及生物转化纤维质废弃物产酶研究

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木质纤维素作为一种可再生的能源和实物性资源,其价格低廉、来源广泛,对缓解能源和资源危机起着重要的作用。但由于木质纤维素原料组成复杂、单一菌种发酵效果不佳,因此不适于大批量生产。为了解决以上问题,本论文以追求低成本而达到高性价比为目标对木质纤维素废弃物进行菌群发酵研究,并对固体酶曲配方进行了优化。本文首先以城市纤维质垃圾——落叶为底物,通过对比实验证实了混菌发酵和底物复配发酵产复合酶的优势。基于以上实验结果,在天然微生态群系的基础上强化接种产酶微生物,并通过另外两种底物,麦麸和桔皮的复配进行固态发酵产复合酶。为了提高复纤维素酶活,运用单因素实验和响应面实验对复合酶曲的配方进行了优化,结果显示:在落叶、麦麸和桔皮的质量比约为9:8:3,且含水量为2.2m1/g时,复合酶曲产纤维素酶活力最佳,CMC酶活为5.54U/gds,滤纸酶活为1.1U/gds,其他几种酶(淀粉酶、果胶酶、木聚糖酶)也能产生一定的酶活,且最高酶活分别为:淀粉酶71.61U/gds,果胶酶16.68U/gds,木聚糖酶4.5U/gds,但优化条件与纤维素酶的优化条件不同。对构建微生态菌群的细菌和真菌组成分析,结果显示:所构建微生态群系菌相组成丰富,主要有曲霉、青霉、木霉、根霉,假单胞菌,Dysgonomonas,代尔夫特菌等微生物,且产酶稳定,常温存放8个月后仍能保持较高的酶活。基于对落叶复合酶曲的研究模式,本文还对另外3种纤维质废弃物——废纸、白菜帮、花椰菜帮复合酶曲进行了构建并优化,结果显示:废纸复合酶曲中,各个酶活的最佳值为:CMC酶10.1U/gds,滤纸酶2.18U/gds,淀粉酶137.87U/gds,果胶酶23.4U/gds,木聚糖酶9.76U/gds;白菜帮曲中,各个酶活的最佳值为:CMC酶13.47U/gds,滤纸酶2.92U/gds,淀粉酶152.59U/gds,果胶酶52.27U/gds,木聚糖酶11.44U/gds;花椰菜帮曲中,各个酶活的最佳值为:CMC酶10.54U/gds,滤纸酶2.46U/gds,淀粉酶126.02U/gds,果胶酶49.59U/gds,木聚糖酶15.87U/gds。且这些复合酶曲经过8个月的保存后基本都能保持较高的酶活。
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