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目的：本课题立足中医基础理论,结合现代医学研究,旨在通过实验研究,观察补肾中药对雄激素致不孕雌性大鼠卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、血清雌二醇( E2)、孕酮(P)、睾酮(T)水平、卵巢组织形态学变化及卵巢雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达情况的影响,探讨补肾中药治疗排卵障碍性不孕症的作用机理,从而为排卵障碍性不孕症的治疗提供更为开阔的科研思路和临床治疗依据。
方法：本实验选用SD雌性幼鼠,于出生第九日龄注射丙酸睾丸酮制作雄激素致不孕大鼠模型。将实验动物随机分为 7 组,即序贯高剂量组、序贯低剂量组、补肾填精方高剂量组、补肾填精方低剂量组、枸橼酸氯米芬组、空白对照组及模型对照组。同种饲养条件下,分笼喂养, 每日定时灌胃给药 1 次。序贯高、低剂量组给药剂量分别为补肾填精方 29g/kg(以生药量计)、14.5g/kg,补肾活血方24g/kg、12g/kg,每方各连续灌胃3天,交替进行,6天为一个周期。补肾填精方高、低剂量组给药剂量分别为29g/kg、14.5g/kg。分别相当于临床剂量的6.7倍、3.35倍。枸橼酸氯米芬组给药剂量为5.58mg/kg,相当于临床剂量的6.7倍。各组用药体积均为18ml/kg。空白对照组、模型对照组给予等量去离子水。均连续给药30天。给药30天后,经阴道细胞涂片观察并挑选处于动情期的大鼠,进行指标测定。用放射免疫法测定大鼠血清 FSH、LH、E2、P、T 的含量；用免疫组化法观察大鼠卵巢的组织形态学变化和大鼠卵巢雌、孕激素受体的表达情况。
结果：(1)序贯高剂量组、补肾填精方高剂量组、氯米芬组均能提高不孕大鼠血清FSH、E2激素水平,与模型对照组比较,差别有统计学意义(P<0.01或P<0.05),其中序贯高剂量组大鼠血清FSH、E2水平均明显高于补肾填精方低剂量组,差别有统计学意义(P<0.05),其与补肾填精方高剂量组比较虽无统计学意义,但有升高的趋势。序贯高剂量组、氯米芬组大鼠血清LH、P水平亦较模型对照组明显升高,差别有统计学意义(P<0.01),其中序贯高剂量组大鼠血清LH、P水平明显高于补肾填精方高、低剂量组,差别有统计学意义(P<0.01)。序贯高剂量组、补肾填精方高剂量组、氯米芬组都能明显降低不孕大鼠血清T水平,差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(2) 序贯高剂量组、氯米芬组大鼠的原始卵泡数均高于模型对照组,差别有统计学意义(P<0.05)。序贯高剂量组、补肾填精方高剂量组、氯米芬组大鼠的初次级卵泡数都明显高于模型对照组,差别有统计学意义(P<0.01)。与模型对照组比较,序贯高剂量组、补肾填精方高剂量组、氯米芬组成熟卵泡数、黄体数明显升高,差别有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。序贯高、低剂量组、补肾填精方高剂量组、氯米芬组卵 泡成熟总数与模型对照组比较明显升高,差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(3)序贯高剂量组和氯米芬组卵巢 ER 表达与模型对照组比较有统计学意义(P <0.05)。序贯高剂量组、补肾填精方高剂量组、氯米芬组的大鼠卵巢 PR 的表达与模型对照组相比有明显增强,有统计学意义(P<0.05)。
结论：补肾促排卵系列方促排卵的机制可能是因其能改善下丘脑—垂体—卵巢轴的功能。降低 T 水平,对性腺轴的干扰解除,FSH、LH 得以正常的分泌,排卵功能恢复正常,卵巢分泌性激素正常,ER、PR随之增高,能够促进各级卵泡发育、成熟,排卵及黄体形成。