目的：1．观察长脉宽1064nm Nd:YAG激光对5种甲真菌病重要致病菌（红色毛癣菌、须癣毛癣菌、白念珠菌、近平滑念珠菌、烟曲霉）生长及超微结构的影响，了解激光照射前后某些重要致病真菌，如白念珠菌对药物敏感度的改变等；2．应用长脉宽1064nm Nd:YAG激光治疗系列甲真菌病患者，初步了解其临床、真菌学疗效及安全性。方法：第一部分：1．将红色毛癣菌、须癣毛癣菌的菌悬液均匀点种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）上，生长4～5天至形成一定大小菌落后，用不同能量的1064nm Nd:YAG激光直接照射菌落，每个平皿留一个菌落作阴性对照，观察经不同能量激光照射后第1、3、6天菌落生长受抑制的直径变化情况；白念珠菌、近平滑念珠菌的菌悬液点种于沙堡弱培养基（SDA）上生长2天，给予不同能量激光照射菌落，观察其次代培养存活率的差异；烟曲霉菌悬液铺满整个PDA平皿生长1天，经不同能量激光照射后，第2天观察经激光照射受抑制的菌落空白处直径大小差异。2．如上经不同能量激光照射后的红色毛癣菌、须癣毛癣菌、白念珠菌、近平滑念珠菌、烟曲霉，选择对各菌产生生长抑制甚至杀灭作用的能量组及阴性对照组，观察其超微结构的变化。3．根据CLSI-M27A3文件推荐的微量稀释法，检测伊曲康唑、氟康唑、卡泊芬净对激光照射前后的白念珠菌Y01-09最低抑菌浓度（MIC），并比较白念珠菌Y01-09在接受激光照射前后药物敏感度有无改变。第二部分：对14例甲真菌病患者，共计37个真菌感染的病甲采用长脉宽Nd:YAG1064nm激光照射治疗。治疗参数设置如下：能量范围35-40J/cm2，斑点直径4mm，脉冲宽度35ms，频率1Hz。我们将病甲的严重程度依据制定的SCIO评分体系进行分级，然后根据不同严重程度对患者病甲进行6～8个疗程的激光照射治疗，每个疗程间间隔1周，为充分覆盖甲板，每个疗程均对所有病甲照射4次，每次间隔1分钟。此后分别在首次治疗后的第2、6、10个月时进行随访，观察甲的生长情况，评价其临床疗效；并在激光治疗前、首次治疗后的2个月分别对病甲进行真菌镜检和培养，计算其真菌学治愈率；同时所有患者在每个疗程结束后，询问其疼痛程度及其他不适症状，后期随访中观察可能发生的不良反应。结果：第一部分：1.观察红色毛癣菌、须癣毛癣菌，激光能量达到3200J/cm2及以上时，菌落直径明显小于0J/cm2对照组（P＜0.05），然而6400J/cm2、12800J/cm2、25600J/cm2三组间菌落直径均无显著差异（P＞0.05）。2．观察白念珠菌、近平滑念珠菌，当能量达到3200J/cm2及以上时，两菌的次代存活率与对照组相比均降低（P＜0.05）。3．观察烟曲霉，当激光能量≥3200J/cm2时有生长抑制发生，且能量越大受抑制的菌落空白处直径越大（P均＜0.05）。4．观察以上5种致病菌在未经激光照射、激光能量3200J/cm2、6400J/cm2、12800J/cm2时的超微结构变化，结果显示：随着激光能量的增大，各菌的超微结构都呈现不同程度的损坏，且能量越大，损坏程度越严重。5白念珠菌Y01-09在受激光照射前后药物敏感性实验结果：在不引发生长抑制的各能量照射（800J/cm2组、1600J/cm2组）组中，白念株菌Y01-09与未照射组相比，生长情况一致，对伊曲康唑、氟康唑、卡泊芬净的药物敏感度没有发生改变；而在引起生长抑制的能量照射（3200J/cm2）组中，各药物浓度下（包括低于CLSI-M27A3方案推荐药物梯度下限的各孔）均未见菌生长，未加药物的对照孔也未见生长。第二部分：14例患者共计37个病甲接受6～8个疗程的Nd:YAG1064nm激光治疗，首次治疗后2个月、6个月、10个月的临床有效率分别为40.54%、48.65%、56.76%；首次激光治疗后2个月时，14例患者甲真菌病的真菌学治愈率为78.57%；在整个治疗过程中患者以温热感为主，偶有轻度灼热痛，可耐受，随访中未发现不良反应。结论：1．在体外，长脉宽1064nm Nd:YAG激光当能量累计达到一定量时可对5种甲真菌病重要致病菌（红色毛癣菌、须癣毛癣菌、白念珠菌、近平滑念珠菌、烟曲霉）产生明显的生长抑制或杀灭作用，并能引起各菌超微结构的改变。2．对于不引起白念珠菌发生生长抑制的能量照射，白念珠菌Y01-09对伊曲康唑、氟康唑、卡泊芬净的药物敏感度没有改变；而对于引起生长抑制的能量照射，菌活力极大减弱，培养不生长。3．长脉宽1064nm Nd:YAG激光对不同严重程度的甲真菌病均具有较好的疗效，其治疗安全、有效、简单、没有不良反应，为甲真菌病的治疗提供了新的选择，对于老年人、免疫力低下及肝肾功能不佳的甲真菌病患者具有独特的治疗优势。