类石墨相碳化氮的合成及其在乳腺癌肿瘤标记物检测中的应用

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乳腺癌是一种女性常见的恶性肿瘤,发病率呈现逐年攀升的现象,早期发现和治疗对延长患者后期的存活时间和提高生活质量有重要意义。本文对两种常见的乳腺癌肿瘤标记物---------血管内皮生长因子(VEGF)和人类表皮生长因子受体2(Cerb B-2)相关基因片段进行了研究,寻找一种简易、非创、灵敏度高的检测方法。近年来,随着纳米科技的发展,研究者们发现类石墨相碳化氮(C3N4)具有优异的物理化学性能,在生物学领域有着广阔的应用。尤其在恶性肿瘤检测中有潜在的应用前景。本文对C3N4的合成及其在乳腺癌肿瘤相关标记物检测中的应用进行了初步的探索研究。第一部分对类石墨相C3N4纳米薄片的制备进行初步研究。首先以三聚氰胺为前驱体,采用高温煅烧制备类石墨相C3N4纳米片(bulk-g C3N4),再通过超声剥离的方法,得到类石墨相C3N4纳米薄片(g-C3N4-NF)。并构建了一种基于g-C3N4-NF的荧光传感器来检测靶标DNA:乳腺癌Cerb B-2相关基因片段。通过测定在不同浓度靶标DNA下的荧光强度(Fluorescence,F),在最佳条件下,荧光强度F与目标DNA序列的浓度在0.1nM~200nM范围内呈良好的线性关系,回归方程为:F=32.12Log(C)+32.76, r=0.9974,检测限达0.02nM。第二部分采用微波合成法制备类石墨相C3N4纳米片(bulk-g-C3N4),再通过超声剥离的方法,得到水溶性更好的类石墨相C3N4纳米片(g-C3N4-NF)。并构建了一种基于g-C3N4-NF和酶切循环信号放大技术的荧光传感器,用于乳腺癌Cerb B-2相关基因片段的检测。在最佳条件下,荧光强度F与目标DNA序列的浓度在5fM~0.1pM范围内呈良好的线性关系,回归方程为:F=183.97744-1.52594C, r=0.9970,检测限达0.2fM。第三部分基于第二部分得到的类石墨相C3N4纳米片(g-C3N4-NF),对乳腺癌中血管内皮因子(VEGF)的检测进行了研究,并构建了一种基于g-C3N4-NF和核酸适配体技术的荧光传感器,用于乳腺癌中VEGF的检测。在最佳条件下,荧光强度F与VEGF的浓度在10pM-80pM范围内呈良好的线性关系,回归方程为:F=153.195-1.72804C,r=0.9857,检测限达3.5pM。
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