论文部分内容阅读
目的:为寻求具有护肤作用的玛咖活性物质,优化玛咖各成分提取工艺并进行初步纯化。将玛咖氨基酸、多酚、多糖、生物碱作为研究对象,探究其护肤作用,并进行安全性检测。方法:（1）通过单因素和正交试验优化玛咖游离氨基酸提取工艺。（2）采用离子交换树脂柱色谱分离纯化氨基酸,考察阳离子交换树脂动力学吸附和吸附时间、洗脱剂的浓度。（3）通过单因素和正交试验优化玛咖多酚、生物碱提取工艺。（4）采用响应面法优化玛咖多糖提取工艺。（5）采用DPPH自由基清除率法、总抗氧化能力测定试剂盒（FRAP法）、羟自由基试剂盒评价玛咖各成分抗氧化能力。（6）采用抑制酪氨酸酶活性实验评价玛咖四种成分美白活性。（7）以甘油为对照品,通过体外重量法,在相对湿度为32%、81%测定玛咖各成分保湿性能。（8）在280400nm波长下测定玛咖各成分溶液吸光度,比较其抗紫外线活性。（9）进行急性经口毒性实验和皮肤刺激性实验检测玛咖提取物安全性。结果:（1）玛咖总游离氨基酸最佳提取工艺为乙醇浓度70%、料液比1g:10mL、提取时间4h、提取3次,在此提取工艺下,测得玛咖总游离氨基酸浸出量为39.32mg/g。（2）玛咖氨基酸纯化工艺为上柱液pH2,上柱后吸附6h,洗脱液为3%氨水。经过纯化,产物纯度75.29%。（3）玛咖多酚最佳工艺为用蒸馏水按料液比1g:75mL,提取2.5h,测得玛咖多酚提取率为7.21mg/g,经有机溶剂萃取萃取得玛咖总多酚,纯度为12.27%;玛咖生物碱提取工艺为:0.5%HCl95%乙醇溶液,在75℃下按料液比1g:20mL、1g:10mL、1g:10mL提取3次,提取6h,玛咖生物碱提取率为1.22%。经酸溶碱沉后玛咖总生物碱纯度为15.98%。（4）玛咖多糖提取工艺为以料液比1g:23mL、提取温度76℃,水提3.3h,玛咖多糖提取率为9.68mg/g,经醇沉、Sevage法除蛋白等方法得玛咖总多糖,纯度为56.34%。（5）抗氧化能力研究中,DPPH自由基清除率能力方面,玛咖各成分IC50值从小到大顺序:氨基酸<多酚<多糖<生物碱。总抗氧化能力方面,玛咖各成分从高到低依次为:氨基酸>多酚>生物碱>多糖。羟自由基清除方面,玛咖各成分从高到低依次为:生物碱>多糖>氨基酸>多酚。（6）在抑制酪氨酸酶活性能力上,玛咖各成分从高到低依次为:氨基酸>多酚>生物碱>多糖。（7）在保湿性的初步研究中,玛咖多糖保湿率大于甘油,氨基酸略小于甘油,生物碱和多酚保湿性较差。（8）玛咖4种成分防晒效果从大到小为:氨基酸>多酚>多糖>生物碱。（9）在小鼠急性经口毒性实验中,玛咖活性成分最大给药剂量达到5000mg/kg,观察期内无死亡,无不良反应。在皮肤刺激实验中,玛咖活性成分皮肤刺激强度评价为无刺激性。结论:通过优化玛咖有效成分提取、纯化工艺,为玛咖应用发展奠定了基础。玛咖四种成分中,玛咖总氨基酸抗氧化、美白、抗紫外线活性最强,玛咖总多糖保湿性最强。