地衣芽孢杆菌产酱香的发酵工艺与转座子突变体库的构建

被引量 : 0次 | 上传用户:wly8213
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文以实验室分离筛选到的产酱香地衣芽孢杆菌B2作为出发菌株,对其产酱香发酵工艺进行探究,同时对酱香风味进行测定比较,最后利用分子技术对构建突变体库进行了前期的研究,研究结果如下:(1)采用感官评价,对几种不同原料的培养基发酵后产香味道进行分辨,选择B2发酵最适培养基。结果发现:麸皮液体培养基效果最佳。由于产酱香芽孢杆菌在生长中分泌出的蛋白酶,可以分解原料中蛋白质成为某些氨基酸,这便是酱香风味形成的前体物质。故选择蛋白质含量更高的麸皮作为培养原料。(2)采用麸皮液体培养基进行不同培养方式的研究,发现:振荡培养比静置培养发酵产酱香香气感官明显,并在转速达150r/min以上香味尤为浓郁。(3)经选择四因素四水平的正交试验,得到B2发酵最佳发酵条件为:接种量为10%,发酵温度为55℃,含水量为70%,发酵时间为6d。在该优化产香条件下,测得B2的发酵产物中糠醛的含量为:24.34mg/L,相对优化之前的方案其发酵产糠醛的含量提高了28%。(4)针对酱香风味物质成分复杂和不确定性,选择酱香风味物质中比较有代表性的糠醛、乙偶姻作为酱香风味的检测指标。根据糠醛的特性采用HPLC法来测定;同时由于乙偶姻出峰时间早,糠醛与四甲基吡嗪难以分离,而采用GC法来测定发酵液中乙偶姻的含量。以上2种检测方法都有良好的重现性和分离度,但相比较而言,在实际操作过程中,利用GC手段进行检测操作简便、结果直观。使用HPLC法,前处理程序复杂,测定时间长,特别对于后续进行测定突变体库中大量突变体发酵产物,采用GC检测更加合适。(5)将携带有Mini-Tn10转座子的质粒pIC333转化到B2菌体细胞中,经高温多轮次诱导转座,转座子随机插入得到B2基因组中。通过对突变株抗性和PCR验证,突变菌株在壮观霉素有耐受性,而没有红霉素耐受性;电泳图谱显示突变株均扩增出340左右bp片段,说明转座子Tn10成功插入受体细胞的基因组中。因此,成功地利用Tn10转座子插入技术构建了地衣芽孢杆菌B2的突变体库,为后续进行产香机理研究提供基础。
其他文献
<正> 本文根据亚太地区现有的各种经济力量,试图对亚太一体化各种构想的可行性进行探讨。二 亚太地区的经济一体化构想关于在太平洋国家建立一体化经济的最早倡导之一来自日
就业是残疾人最关心的问题之一。他们在求职就业的过程中经常会遭遇各种困境。最突出的就是残疾人就业的正当资源和权力被剥夺,而导致他们处于一种“无权”的状态,并且这种“无
提到木马,大家并不陌生,但是为什么还是有很多人屡屡中招,死在木马的“蹄”下呢?原因很简单,因为大家不能识别木马,木马也不会告诉你“我是一个木马,你要当心了”。相反,木马
针对某2D70铝合金筒形件表面阳极氧化膜颜色异常发白的缺陷,利用光学显微镜、扫描电子显微镜、透射电子显微镜和电导率仪等研究了基体及氧化膜的显微组织、微区成分、析出相
近几年,以明德中学、长沙市一中、地质中学、麓山国际实验学校为代表的湖南省中学生男子篮球运动队,在国内、省内中学生男子篮球比赛中取得了良好的成绩,为省内外各高校和专
目的:建立高效液相色谱法测定妇康凝胶中苦参碱含量。方法:采用Shimadzu-C18柱,乙腈-0.02%三乙胺(30∶70)为流动相;检测波长为230 nm。结果:测得苦参碱线性范围1.015~5.075μg
证明责任契约是双方当事人通过约定变更证明责任,即当出现真伪不明的情况下,不利后果的承担原本应当由证明责任规范予以规定,通过证明责任契约变更此规定。证明责任契约对于目前
人为万物灵长,人类的延续在于人的结合,孤立的个人难以自处,人格的形成必须在人与人的交往中才能形成。从人的出生到死亡,家庭能够提供给人心理、教育、经济上最重要的支持,家庭对
<正>胰腺癌发病率占恶性肿瘤的1%~2%,在我国居肿瘤死亡原因的第4~7位,且近年发病率呈明显上升趋势。该病起病隐匿,进展快,转移早,治疗棘手,为预后最差的肿瘤,其2 a生存率不超