和肾络法对肾间质纤维化miR-200a、miR-29c的影响

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目的:观察和络泄浊颗粒对大鼠肾脏mi R-200a、mi R-29c的影响,探讨和法在肾间质纤维化的应用。方法:选雄性SD大鼠30只,随机分为Sham组(n=10)、UUO组(n=10)和UUO+REG组(n=10),手术采用单侧输尿管结扎术(UUO),以10%水合氯醛按0.35mg/kg腹腔注射麻醉实验大鼠后,取大鼠左侧腹部肾区切口,逐层分离并暴露左侧输尿管,以5-0缝合线结扎肾盏和肾下极处输尿管2道,并不离断输尿管,术中注意不碰伤肾包膜及周围组织,结扎输尿管后,肾置于原位;缝合腹膜、肌肉、皮肤。Sham组不结扎输尿管,其余操作步骤均与上述相同。术后予Sham组和UUO组生理盐水按10ml/kg.d-1灌胃,而UUO+REG组则给予生药含量为1g/ml和络泄浊颗粒按10g/kg.d-1灌胃。各组于术后第7天、第14天处死5只。每个大鼠左肾脏取出后,于低温下沿着肾脏纵切面(矢状面)分两半,一半肾脏组织用于RT-PCR检测mi R-200a和mi R-29c;另一半则用于HE染色、免疫组化检测α-SMA。结果:UUO成功建立慢性肾脏纤维大鼠模型。与Sham组相比,UUO组和UUO+REG组肾组织中α-SMA明显增多,其随时间的延长而增多。与Sham组相比,mi R-200a和mi R-29c在UUO组和UUO+REG组均表达下降,并随时间的延长,表达量逐渐降低;UUO+REG组高于UUO组表达量。在第7天和第14天,与UUO组相比较,mi R-200a在Sham组表达量有明显的统计学意义(P<0.01);与UUO+REG组相比,与两组亦有差异(P<0.05)。在第7天,与Sham组相比,其余两组mi R-29c表达量均较Sham组少(P<0.05),UUO组与UUO+REG组在第7天无明显差异(P>0.05),但在14天UUO组表达量少于Sham组和UUO+REG组(P<0.05)。结论:以和法为指导思想运用和络泄浊颗粒可以增加肾脏组织mi R-200a和mi R-29c表达量,延缓肾间质纤维化。
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