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急性淋巴细胞白血病(ALL)是源于单个B或T淋巴细胞前体细胞的恶性肿瘤。ALL好发于儿童及青少年,在儿童中预后较好,在成人中,使用标准化疗方案往往可以实现首次缓解,但是复发率高达70-80%,传统化疗药物对正常组织特别是造血系统的毒性作用限制了化疗药物的使用剂量,因此寻求高效低毒的治疗手段成为目前研究的热点。小檗碱可以从中药黄连、黄柏和三颗针等小檗属植物中提取,现代研究表明小檗碱对多种实体肿瘤及血液系统肿瘤均表现出抗肿瘤活性,其主要作用为诱导肿瘤细胞凋亡,细胞周期阻滞,抑制肿瘤新生血管生成,而对正常组织副作用小。本实验主要研究盐酸小檗碱对人白血病Jurkat细胞细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期及Survivin基因表达是否存在影响。我们采用了改良MTT法测定Jurkat细胞的IC50及细胞毒作用,Hoechst33342荧光染色法观察细胞核的变化,流式细胞术AnnexinV-FITC+PI法检测细胞凋亡,PI单染法检测细胞周期,半定量RT-PCR法检测Survivin基因表达。结果显示,在0-10μg/ml药物浓度范围,Jurkat细胞的生长是明显受抑制的,随着盐酸小檗碱浓度增大Jurkat细胞生长率逐渐减低,说明盐酸小檗碱对Jurkat细胞的抑制作用呈浓度依赖性。盐酸小檗碱24小时、48小时、72小时作用Jurkat细胞的IC50值分别为：6.94μg/ml、3.94μg/ml、2.45μg/ml,说明盐酸小檗碱对Jurkat细胞的生长抑制作用亦呈时间依赖性。0μg/ml及5μg/ml盐酸小檗碱作用于Jurkat细胞48小时后,通过Hoechst染色,Jurkat细胞细胞核出现凋亡改变：细胞核变形,核质浓缩,并出现凋亡小体。AnnexinV-FITC+PI法检测盐酸小檗碱对Jurkat细胞凋亡后发现,0,0.1,0.5,1,5,10μg/ml盐酸小檗碱处理Jurkat细胞48h后,早期凋亡细胞比例分别为：2.06%±0.51%,3.60%±1.05%,3.38%±1.37%,3.97%±1.53%,12.77%±1.07%,14.27%±2.11%。PI单染检测结果显示,细胞周期阻滞于S期,同时,RT-PCR检测显示Survivin基因表达下降。综上所述,盐酸小檗碱对Jurkat细胞有抑制增殖、诱导凋亡和周期阻滞作用,可能与盐酸小檗碱下调Jurkat细胞Survivin基因表达有关。图7幅,表3个,参考文献41篇。