侵染广东玉米的嘴突脐孢鉴定及产孢基因研究

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嘴突脐孢(Exserohilumrostratum)是突脐蠕孢属中的一个种,由嘴突长蠕孢(HelminthosporiumrostratumDrechlsler)和盐长蠕孢(HelminthosporiumhalodesDrechsle,)合并而来的。国内最早1956年在画眉草上发现该菌。本研究首次在广东玉米上分离到该病原菌三个菌株,分别命名为ER4、ER6和ER7。在培养观察试验中,从菌株ER7的后代发现两个生物学性状差异很大的菌株ER7chan和ER7bu,前者产孢量很大,后者不产孢。本研究对嘴突脐孢进行了形态学鉴定,并做了接种试验。采用ITS、Bml和RAPD分子分析方法对该病原菌进行分子水平鉴定和亲缘关系分析,并对ER7、ER7chan和ER7bu菌株差异mRNA进行初步分析。研究获得如下结论: (1)形态学鉴定和分子鉴定结果相一致,表明从广东玉米叶斑病病斑上分离到的三个菌株均为嘴突脐孢。 (2)接种试验结果显示该病菌侵染需要较大湿度和较高温度。从单个分生孢子侵染点周围中毒区域较大可见病原菌侵入时产生的毒性较大。从病斑后期产孢量很大的情况证明病菌在玉米上的繁殖率相当高。病菌适合高温,对寄主毒性强和产孢率高三个特点显示,嘴突突脐蠕孢是我省甜玉米生产上潜在胁威较大的病原菌。 (3)通过Bml基因序列分析和ITS序列分析,在核酸水平上鉴定7个菌株的分类地位,验证了Bml基因适合进行突脐蠕孢种问分子系统学和种的界定研究的结论。虽然ITS序列分析结果和Bml基因序列结果相同,但是因为个别种问的序列差异太小,不宜单独用来研究突脐蠕孢种间分子系统学。 (4)通过ITS序列分析从核酸水平更清楚地明确了ER7chan菌株和ER7bu菌株是ER7菌株的变异株。RAPD电泳分析的结果补充印证了这一点。 (5)通过这三个菌株菌丝体差异功能基因的初步分析,从不产孢菌株中克隆出一条400bp的片段,该片段在NCBI数据库中找不到同源性高的序列,该序列是否和产孢基因有关还需要进一步的验证。
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