论文部分内容阅读
近年来,随着检测技术的发展,血清雌二醇和四种嘌呤核苷类物质成为新的指标应用于临床,因此其相关领域的检测也急剧增加,需求日益广泛,为保证临床检验的标准化,本文研制了血清雌二醇和四种嘌呤核苷类标准物质以满足临床检测需求。在血清雌二醇基体标准物质研制过程中,建立了同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC/MS/MS)准确测定血清中雌二醇的含量,使用电喷雾三重四级杆串联质谱多重反应监测模式(MRM),通过优化色谱质谱参数,确定最佳的仪器分析条件。实验优化了血清样品的前处理条件,包括比较不同的雌二醇内标物、添加提取剂、萃取前血清所需的pH值、摸索淋洗条件以及平衡时问等,使雌二醇的提取效果最好,建立了合适的样品制备路线。并进一步对血清样品进行均匀性检验、稳定性监测以及不确定度评定,并进行了方法学验证(精密度、准确性、线性关系、检测限等)；采用2013IFCC RELA比对(JCTLM)样品和欧洲标准局标准物质血清17β-雌二醇标准物质进行了方法验证,测量结果溯源到JCTLM认可的标准物质,保证了标准物质的溯源性和量值的准确,从而完成了血清雌二醇基体标准物质的研制。本文结合国内外相关研究技术基础,采用红外光谱法和质谱法对四种嘌呤核苷类样品主成分进行了定性分析；通过优化分析实验条件完成了基于高效液相色谱的质量平衡法与定量核磁共振法两种不同原理的定值分析方法,同时完成了水分、灰分及无机离子含量的测定；并进一步对四种嘌呤核苷类标准物质进行了均匀性检验、稳定性监测以及不确定度的评定。结果表明,四种嘌呤核苷类标准物质纯度较高,其中鸟苷纯度为90.89%,扩展不确定度0.56%(k=2)：2’-脱氧鸟苷纯度为94.51%,扩展不确定度0.34%(k=2)；8-羟基-鸟苷纯度为94.22%,扩展不确定度0.34%(k=-2)；8-羟基-2’-脱氧鸟苷纯度为91.02%,扩展不确定度0.28%(k=2)：四种标准物质均匀性良好且一年范围监测稳定性良好。血清中雌二醇基体标准物质的研制填补了国内空白,四种嘌呤核苷类纯度标准物质的研制填补了国际空白,该类临床用标准物质的研制可用于相关成分的测定、分析仪器的校准、分析方法的确认及相关生产部门和实验室的质量控制等。