【摘 要】
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本文较为系统的研究了蓖麻蚕核型多角体病毒(Attacus ricini nuclear polyhedrosis virus,简称ArNPV)形态特征和生化特性,并预测了多角体蛋白的二级结构,为开发利用蓖麻蚕核型多
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本文较为系统的研究了蓖麻蚕核型多角体病毒(Attacus ricini nuclear polyhedrosis virus,简称ArNPV)形态特征和生化特性,并预测了多角体蛋白的二级结构,为开发利用蓖麻蚕核型多角体病毒这一生物资源提供了理论参考。采用不连续系统垂直板SDS-PAGE分析了ArNPV的多角体蛋白、病毒粒子结构多肽的组成及分子量。用薄层等电聚焦的方法测定了蛋白质的等电点。应用5种限制性内切酶对ArNPV基因组DNA进行了酶切分析。对蓖麻蚕核型多角体病毒的超微结构进行电镜观察和描述。对多角体蛋白进行紫外、荧光、红外光谱分析,并通过去卷积的方法分析了该蛋白的酰胺Ⅰ带。用Antheprot软件预测其二级结构。结果表明:ArNPV多角体蛋白仅有一条带,分子量为29kD;病毒粒子包含16种结构多肽,分子量范围在15.2~97.5kD之间。多角体蛋白的等电点为pH5.8,病毒粒子结构多肽的等电点分布于pH4.8~6.4之间。ArNPV基因组DNA经BamHⅠ、EcoRⅠ、Hind Ⅲ、PstⅠ及BglⅡ酶切分别产生12、14、10、9和8条片段,分子量为76.9×10~6D。病毒多角体为12面体和多面体结构,大小不一,平均直径为2.4μm;多角体碱解后释放出杆状的病毒束,大小为320~417nm×83~227nm,核衣壳大小比较均一,约为320nm×83nm。通过多角体超薄切片的横切面观察,囊膜内包被的核衣壳数变动于1~10之间,只包被1个核衣壳的数目最多,约占总数的80.04%,病毒束在排列图式上存在差异。光谱分析的结果表明,多角体蛋白在溶液中以α-螺旋为主,在固态时α-螺旋和β-折叠共同存在。通过软件分析,预测多角体蛋白分子中α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规卷曲的百分含量分别为29%、22%、22%、27%。整个分子中有2个亲水区与2个疏水区,无跨膜区。
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