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目的探讨缺氧诱导因子及血管内皮生长因子在胶质瘤演进过程的作用,尝试基因抑制胶质瘤生长方法A172细胞(人胶质瘤细胞)常氧环境培育,随机分为两组:(1)转染组:无双抗细胞培养液常氧培育待细胞长满培养皿底(10cm)60%,lipofectamine2000转染si Hif-1质粒,5小时后换普通含双抗细胞培养液。(2)对照组:无双抗细胞培养液常氧培育待细胞长满培养皿底(10cm)60%,lipofectamine2000转染阴性对照质粒,5小时后换普通含双抗细胞培养液。两组常氧培育12小时,12小时候氯化钴模拟缺氧环境培养。运用western blot、免疫荧光技术在0h、6h、12h、18h、24h分别检测缺氧诱导蛋白(HIF-1α)及血管内皮生长因子的表达变化。用QPCR技术检测RNA表达的变化。结果免疫荧光及蛋白印迹法(Western blot)结果显示HIF-1α表达受到明显抑制的情况下,VEGF在18小时候开始出现明显抑制。在缺氧培育开始后,western blot结果显示缺氧诱导因子(HIF-1α)的表达水平明显地被si RNA抑制,同时血管内皮生长因子(VEGF)的表达在18小时内存在波动,18小时候出现稳定下降,而VEGF的表达被抑制,意味着si RNA抑制HIF-1α可有效抑制相关VEGF表达。此外,QPCR结果显示HIF-1α和VEGF基因表达水平明显地被si RNA抑制,同时两种基因表达下调也表明si RNA抑制对VEGF的抑制作用。免疫荧光染色结果显示缺氧环境下HIF-1α主要表达在细胞核,VEGF主要表达在细胞浆。与此同时,荧光染色观察到si RNA明显减少了肿瘤细胞内VEGF的表达。结论si RNA通过抑制HIF-1α表达明显地抑制了肿瘤细胞内血管内皮生长因子的表达,基因水平和蛋白水平都有明显抑制。