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目的：通过比较尼古丁单独作用及尼古丁与大蒜素共同作用后牙周膜成纤维细胞的存活率及细胞内谷胱甘肽的浓度,探讨大蒜素对尼古丁在牙周膜成纤维细胞所引起的氧化毒性的影响,为大蒜素运用于牙周病的治疗提供理论依据。
方法：⑴通过组织块培养法对牙周膜成纤维绌胞进行体外培养、传代及鉴定。⑵通过MTT法测定尼古丁对牙周膜成纤维细胞存活率的影响,从而建立尼古丁对牙周膜成纤维细胞氧化毒性的模型。⑶通过MTT法测定大蒜素与尼古丁共同作用后牙周膜成纤维细胞的存活率,评估大蒜素对尼古丁氧化毒性的影响。⑷运用谷胱甘肽试剂盒测定尼古丁单独作用及尼古丁和大蒜素共同作用后不同时间点(1、4、8、12、24h)牙周膜成纤维细胞内谷胱甘肽的浓度。
结果：①成功培养牙周膜成纤维细胞并传代。②与对照组相比,0.8mg/ml、1.6mg/ml尼古丁能够显著降低牙周膜成纤维细胞的存活率(P＜0.05),模型建立成功。③与尼古丁(0.8mg/ml)单独作用组相比,60μg/ml大蒜素可显著提高牙周膜成纤维细胞的存活率(P＜0.05),降低尼古丁的氧化毒性。而15μg/ml、30μg/ml大蒜素则无此效应。⒁与尼古丁(0.8μg/ml)单独作用组相比,60μg/ml大蒜素可显著提高细胞内的谷胱甘肽浓度(P＜0.05),此浓度与对照组细胞内的谷胱甘肽浓度无统计学差异；而15μg/ml、30μg/ml大蒜素无此效应。
结论：⑴一定浓度的尼古丁会对牙周膜成纤维细胞产生氧化毒性。⑵60μg/ml大蒜素可以降低尼古丁对牙周膜成纤维细胞的氧化毒性,提高细胞存活率。⑶60μg/ml大蒜素能够有效阻止尼古丁氧化毒性所致的牙周膜成纤维细胞内谷胱甘肽的消耗。