肿瘤侵袭与转移是指癌细胞脱离原发部位，侵入新环境并生长的过程。主要包括：1．癌细胞穿过基底膜；2．侵入原发部位血管、淋巴管；3．侵入继发部位并降解和穿透基底膜；4．在继发部位生长。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）降解基底膜对上述过程起到核心作用。在已经发现的28种MMPs中，根据其特异性降解底物不同，分为4类，即胶原酶、明胶酶（Ⅳ型胶原酶）、间质溶解素和基质溶解素。其中，明胶酶（MMP-2和MMP-9）降解胶原蛋白，是产生浸润与转移的核心酶。因此，以Ⅳ型胶原酶为靶点设计新型药物是抗转移研究的热门课题。以X线衍射技术研究MMPs的3-D结构，发现明胶酶的活性结合腔（active S’₁ pocket of matrix metalloproteinase）具有比MMP-3更狭长的特点。因此，徐文方等参考MMP-3抑制剂结构，设计合成了以结构细长，柔性较高为特点的吡咯烷连接咖啡酰为基本骨架的全新结构化合物，N1-取代咖啡酰吡咯烷衍生物。在设计理论上，已经具备较易进入明胶酶active S’₁ pocket的能力。本项研究是在体内外初步活性筛选有效基础上，选择其中的典型化合物—LY52，进一步研究其活性作用并探讨机制。 1．瘤细胞生长抑制实验 （1） 体外实验：以MTT法检测LY52对人卵巢上皮癌SKOV3和人喉上皮细胞癌Hep-2的生长抑制作用。结果显示，LY52对肿瘤细胞仅有较弱的生长抑制作用。