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目的鲍曼不动杆菌是医院获得性感染的重要病原菌,在非发酵菌引起的感染中其分离率已超越铜绿假单胞菌[1]。随着碳青霉烯类抗生素的广泛应用和免疫抑制剂的使用，近年来世界范围内鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率呈现急剧上升趋势。本课题对安徽医科大学第一附属医院2010年1月至2010年12月临床分离鉴定的泛耐药鲍曼不动杆菌，进行亚胺培南和美罗培南耐药性检测和耐药机制的研究。方法采用纸片扩散法(K-B法)及琼脂稀释法从临床分离的84株泛耐药鲍曼不动杆菌中随机选取8株，乙二胺四乙酸(EDTA)协同实验筛选金属β-内酰胺酶表型，改良三维试验检测ESBLs和AmpC酶，改良Hodge试验检测碳青霉烯酶，PCR扩增耐药菌株的碳青霉烯酶和ESBLs基因，并测序分析。外排泵抑制试验检测外排泵机制。采用二维电泳和质谱鉴定分析外膜蛋白。结果PAβN抑制试验结果显示8株广泛耐药鲍曼不动杆菌亚胺培南MIC值下降均≤4倍，而有4株美罗培南MIC值下降≥4倍，占50%（4/8）。EDTA协同试验结果显示8株广泛耐药鲍曼不动杆菌均阴性。三维试验结果显示8株耐药菌中均存在能够水解碳青霉烯类抗生素的β-内酰胺酶，酶活性可被克拉维酸抑制，而不能被氯唑西林和EDTA抑制。改良Hodge试验检测8株耐药菌结果阳性。耐药基因PCR扩增和测序结果显示8株耐药菌blaKPC-2酶基因阳性，7株有blaOXA-23基因阳性，5株blaTEM-1基因阳性；耐药菌株和敏感菌株差异膜蛋白组学鉴定出CarO、OmpA和分子量为41×103ku外排泵膜蛋白。结论鲍曼不动杆菌对碳青霉烯耐药机制的主要系产生blaKPC-2酶、blaOXA-23酶，膜孔蛋白CarO表达缺失所致，外排泵过度表达可能参与美罗培南的耐药。