关于过敏性休克死者蛋白酶激活受体-2和SC5b-9的实验研究

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过敏性休克死亡在法医学鉴定中比较常见,近几年来涉及过敏性休克死亡的医疗纠纷逐年攀升。过敏性休克死亡尸检时仅见一般尸体征象,没有特殊的病理形态学改变,因此给法医学鉴定带来很大的障碍。在鉴定中要诊断过敏性休克死亡首先要排除暴力性死亡、疾病、中毒的基础上,然后结合接触过敏原史、临床表现等,并检测血清中IgE、肥大细胞类胰蛋白酶、胃促胰酶、组胺、P物质等的含量,试图为过敏性休克死亡的法医学鉴定提供详实的诊断标准和形态学依据。本实验在此基础上又进行了,蛋白酶激活受体-2和SC5b-9在过敏性休克死者检材的实验研究。(1)蛋白酶激活受体(proteinase activated receptors,PARs)是G蛋白偶联受体(GPCRs)家族中的成员。目前在小鼠和人的体内共发现4种PARs,分别为PAR-1、PAR-2、PAR-3、PAR-4,在1991、1994、1997、1998年它们的基因序列被先后克隆出来。研究显示,在过敏反应所涉及的细胞上几乎都有PARs的表达,其中蛋白酶激活受体-2在人体内的表达部位比其他三个受体多,所以我们检测蛋白酶激活受体-2在过敏性休克死亡中的表达情况,为进一步研究过敏性休克死亡提供诊断依据。实验组:法医病理诊断为过敏性休克死亡46例。对照组:非过敏性休克死亡12例。用免疫组化染色的方法特染蛋白酶激活受体-2。结果在病理诊断为过敏性休克死亡案例中,镜下肾组织内见大量蛋白酶激活受体-2染色阳性细胞,细胞内有大量棕色颗粒,染色阳性的细胞主要位于肾近曲小管和远曲小管的单层立方上皮内。在其他脏器组织内没有见到染色阳性的细胞。非过敏性休克死亡案例中,肺、肾、肠等组织内也没有见到染色阳性的细胞。实验组与对照组比较有显著差异(p<0.05),差异有统计学意义。(2)SC5b-9存在于血液中,为非溶解性的,是补体系统激活后的最终产物,因此测定其血清含量可以直接反映补体系统激活的情况。补体系统是人体内一种复杂的固有免疫系统,可以通过旁路途径、经典途径和甘露糖结合凝集素途径被激活,产生一系列级联放大效应。无论通过何种途径激活补体系统,当补体系统被活化后,会释放各种生物学活性物质,其中就包括C3a和C5a。C3a和C5a具有过敏毒素的作用,能激活肥大细胞和嗜碱性粒细胞使其脱颗粒,从而释放组胺等介质,产生过敏反应症状。而关于SC5b-9在人体内的表达情况,尚缺乏深入的研究,所以我们检测SC5b-9在过敏性休克死亡中的表达情况,为进一步研究过敏性休克死亡提供诊断依据。实验组:法医病理诊断为过敏性休克死亡46例,其中血液(由于受溶血等因素的影响)可用于检测的血清样品只有12例。对照组:非过敏性休克死亡12例,血液样品8例。用Western Blot检测血清中SC5b-9的表达水平。结果过敏性休克死亡案例血清样品中SC5b-9的表达水平明显高于非过敏性休克死亡案例血清样品中SC5b-9的表达水平。实验组与对照组比较有显著差异(p<0.05),差异有统计学意义。综上所述:(1)在过敏性休克死亡案例中,蛋白酶激活受体-2在肾脏组织中的表达异常增高,初步认定蛋白酶激活受体-2参与了过敏性休克的发生过程。(2)在过敏性休克死亡案例中,血清中的SC5b-9的含量明显增高,说明SC5b-9的前身补体被大量激活,初步认定补体参与了过敏性休克发生的某些环节。
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