紫草（Lithospermum erythrorhizon Sieb.et Zucc）,别名硬紫草,药用其根部具有凉血、活血、解毒透疹的作用。主要分布在东北,资源丰富。其主要成分为具有5,8-二羟基萘醌结构的萘醌色素。由于萘醌色素对光、热敏感,故本研究采用CO₂超临界流体萃取法（SFE）在高压常温下提取硬紫草根中的萘醌类化合物,利用硅胶柱层析法,以石油醚-乙酸乙酯为溶剂系统进行梯度洗脱,利用制备HPLC法,以甲醇-水为溶剂系统进行洗脱,从CO₂超临界提取物中分离得到5个单体化合物,通过理化性质、UV、IR、MS、NMR数据的解析,确定了5个化合物的结构:紫草素（shikonin）,乙酰紫草素（acetylshikonin）,β-羟基异戊酰紫草素（β-hydroxy-isovalerylshikonin）,异丁酰紫草素（isobutylshikonin）,异戊酰紫草素（isovalerylshikonin）。同时,本研究以紫草素,乙酰紫草素,β-羟基异戊酰紫草素,异丁酰紫草素,β,β-二甲基丙烯酰紫草素,异戊酰紫草素6种成分为指标,建立了基于HPLC-DAD方法的硬紫草中多组分同时定量的方法。经方法学考察,精密度试验的RSD在0.78～1.4%之间,表明仪器精密度良好;重现性试验中6种萘醌类化合物含量测定结果的RSD在0.39～1.7%之间,表明方法的重复性较好;6种萘醌类化合物的加样回收率在97.0～102.9%之间,表明整个方法具有良好的准确度;样品溶液在24h内稳定。结果表明,该方法简便、准确、重复性好。并依据此法对不同产地的硬紫草进行质量评价,确定下洼子产硬紫草为最佳药材。为今后建立紫草质量评价体系提供了科学依据,奠定了坚实的基础。