【摘 要】
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背景与目的:肾损伤分子-1（Kidney injury molecule-1,Kim-1）是一种I型跨膜蛋白,当机体发生急性肾缺血,中毒性肾损伤后组织再生或肾小管上皮细胞去分化时,广泛表达于近端肾小管上皮细胞的顶膜。越来越多的研究表明Kim-1是肾小管损伤的生物标志物,相对于正常人而言,在肾病患者中Kim-1水平显著升高。现如今,实验或临床研究主要采用酶联免疫吸附实验（Enzyme-Linked
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背景与目的:肾损伤分子-1（Kidney injury molecule-1,Kim-1）是一种I型跨膜蛋白,当机体发生急性肾缺血,中毒性肾损伤后组织再生或肾小管上皮细胞去分化时,广泛表达于近端肾小管上皮细胞的顶膜。越来越多的研究表明Kim-1是肾小管损伤的生物标志物,相对于正常人而言,在肾病患者中Kim-1水平显著升高。现如今,实验或临床研究主要采用酶联免疫吸附实验（Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA）等检测方法测定血清中Kim-1的浓度,但是ELISA存在灵敏度不足,线性范围不宽等缺陷。高灵敏时间分辨荧光免疫分析法（Time-resolved fluorescence immunoassay,TRFIA）灵敏度高,线性范围宽,而且操作简便。因此本研究旨在建立Kim-1-TRFIA法,并探究其在不同类型肾病中的临床应用价值,以期为肾病患者的临床治疗提供参考。方法:Kim-1捕获抗体包被到96孔板上,Eu3+标记Kim-1检测抗体,采用双抗体夹心法建立Kim-1-TRFIA法,并对其进行方法学评估。用建立的Kim-1-TRFIA法检测正常对照组、急性肾损伤（Acute kidney injury,AKI）患者、糖尿病肾病（Diabetic nephropathy,DN）患者、狼疮性肾病（Lupus nephropathy,LN）患者血清Kim-1的浓度,并结合其他临床指标探讨血清Kim-1在肾病中的临床应用价值。结果:1.Kim-1-TRFIA法的分析灵敏度为11 pg/m L,检测范围为11-4666pg/m L。批内、批间的变异系数均小于10%。肝型脂肪酸结合蛋白,中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和胱抑素C三种生物标志物与Kim-1-TRFIA的交叉反应率均小于1%。三份血清样本的平均回收率为97.83%。Kim-1-TRFIA与ELISA两种方法之间的相关系数为0.8062。2.正常对照组、AKI患者、DN患者和LN患者血清Kim-1浓度分别为49.72±16.40、126.50±67.99、160.69±105.58和102.40±77.75 pg/m L。3.根据肾小球滤过率（Estimated Glomerular filtration rate,e GFR）将这3种肾病分为早期,中期和晚期肾病患者。从早期到晚期,血清中Kim-1浓度分别为:AKI患者（86.33±30.33,130.67±60.67,182.00±86.33 pg/m L）、DN患者（147.08±85.19,130.09±122.81,234.01±92.95 pg/m L）、LN患者（69.88±42.94,90.68±25.93,166.29±95.73 pg/m L）。结论:1.成功建立了Kim-1-TRFIA法,方法学评估结果表明Kim-1-TRFIA灵敏度高,线性范围宽,稳定性好,特异性强。2.AKI,DN,LN肾病患者血清中Kim-1浓度均显著高于正常对照组血清中Kim-1的浓度,说明这三种肾病患者的肾小管均发生了不同程度的损伤。DN患者血清中Kim-1的浓度最高,推测这可能与DN更容易造成肾小管损伤有关。3.随着这三种肾病患者病情分期的进展,血清中Kim-1浓度逐渐升高,说明血清Kim-1浓度或可以反映肾脏疾病病情进展的程度,为临床诊断提供一定的临床参考价值,改善预后。
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