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钩吻,别名断肠草、大茶药等,对人有大毒,主要毒性物质为钩吻碱、胡蔓藤碱等生物碱。但钩吻对牛、猪、羊有复壮作用,我国广东、福建等地常用钩吻饲喂畜禽,促进畜禽生长。本研究在本课题组提取纯化钩吻提取物的基础上,用钩吻提取物作为饲料添加剂饲喂育成猪,研究其促生长作用及可能机制,为其开发成为绿色饲料添加剂奠定基础。1、育成猪促生长试验:采用单因素随机分组试验设计,选用体重相近、体况良好的长×大二元杂交仔猪56日龄育成猪75头,平均体重(18.63±0.36)kg,随机分成5组,对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂添加了高(100ppm)、中(50ppm)、低剂量(25ppm)的钩吻醇提取物和150ppm的硫酸提取物的试验饲粮,饲喂时间为49d。结果显示,与对照组相比,饲喂试验结束时,试验组具有明显的增重效果,表现出钩吻提取物对育成猪明显的促生长作用。通过称量育成猪心、肝、脾、肺、肾等重要器官,计算器官指数,结果显示各试验组与对照组相比,各器官指数无显著性差异,表明各剂量钩吻提取物对育成猪心、肝、脾、肺、肾等重要器官无影响。2、检测各试验组育成猪血液生理生化指标,结果表明钩吻提取物对试验猪血液学指标无显著性影响,采用ELISA方法检测其血清中细胞因子,发现钩吻提取物显著升高IL-2、SST(P<0.05),表明钩吻提取物物可提高机体免疫力。3、采用细菌平板计数法测定育成猪盲肠中大肠杆菌和乳酸杆菌数量。结果显示,与对照组相比,各试验组大肠杆菌数量均有所降低,其中高剂量组较对照组降低8.74%,差异显著(P<0.05);与对照组相比,各试验组乳酸杆菌数量升高,分别升高了4.9%和6.5%,其中中剂量表现出显著性差异(P<0.05)、高剂量组为极显著性差异(P<0.01),结果表明钩吻提取物能够促进盲肠中乳酸杆菌增殖的同时,对盲肠内大肠杆菌有一定的抑制作用。4、利用PCR-DGGE技术分析猪盲肠菌群,采用聚类分析不同组间育成猪盲肠菌群的差异性。结果显示钩吻醇提物中剂量组、高剂量组与钩吻酸提组的相似性系数较低,且相似性系数相近,表明以上三个处理组对育成猪盲肠菌群结构有一定的调节作用,且调节强度相似。5、肠道形态学观察:采用光学显微镜和透射电镜观察钩吻提取物对育成猪肠道形态的影响,结果表明钩吻提取物能够改善育成猪的小肠绒毛发育,缓解绒毛损伤,并且能够较好维持肠道的结构形态,以增强肠道的吸收效率、加快育成猪的代谢能力,促进育成猪的生长发育。