毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)技术的快速发展给分析工作者带来了新的机遇和挑战。CE具有快速、经济、分离效率高等优点,广泛应用于分离有机小分子、无机离子、多肽和蛋白质等物质的分离。此外,作为高效液相色谱指纹图谱的补充,中药CE指纹图谱的建立有利于中药质量的控制和真伪优劣的鉴别。通过在线富集(场放大样品堆积、大体积样品堆积、吹扫法等),CE的灵敏度可以得到较大的提高,更好地应用于痕量相关物质的检测。混合模式色谱(mixed-mode chromatography,MMC)选择性好、载样量高,可为分析物的保留提供多重机理,在复杂样品的分离分析中表现出较大的潜力。其固定相的研究是色谱领域的热点之一。本论文着手于药学研究中复杂样品的分析,分别对CE和MMC这两种分离方法进行了一定的研究。主要包括以下四部分内容:1.建立了水蛭的CE指纹图谱。系统考察了水蛭的提取条件及缓冲体系种类、浓度和p H值等因素对水蛭CE指纹图谱的影响。最优的提取条件是以生理盐水为提取溶剂,搅拌3 h;最优的电泳条件为:以含有0.5 m M十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)的100 m M(p H=10.0)磷酸盐为缓冲溶液,分离电压-15 k V,重力进样40 s(12 cm高度)。在最优条件下,以日本医蛭为对象,进行了日内和日间精密度试验、重复性试验及稳定性试验,所有共有指纹峰的相对保留时间和相对保留峰面积的RSD≤5%,同时稳定性试验表明日本医蛭样品溶液在72 h内稳定。以上方法学考察表明,该方法快速、简便、重现性好、灵敏度高、可靠、日内和日间精密度良好,适合于水蛭CE指纹图谱的研究。该方法可用于日本医蛭、宽体金线蛭、尖细金线蛭及菲牛蛭CE指纹图谱的建立,还可用于水蛭产地及种类的鉴别。2.采用场放大-大体积进样CE法检测甲磺酸伊马替尼及相关化合物。系统优化了添加剂的种类和浓度、缓冲液的p H值、有机添加剂的比例、进样方式、进样电压和时间等因素,得到最优的电泳条件如下:10 m M Na H2PO4(p H=2.0)缓冲液;5 m M 2-羟丙基-β-环糊精为添加剂;检测波长为267 nm;分离电压为20 k V。在20 min内完成甲磺酸伊马替尼和代谢物N-去甲伊马替尼以及相关杂质的分离。在此基础上,采用场放大-大体积进样技术提高灵敏度,以甲醇:0.5 M HCl(6:4,v:v)作为样品溶液的稀释溶剂,电动进样(15 k V×60 s)。该方法线性范围较宽、日内和日间精密度均较好,并且简便、有效、经济,可用于甲磺酸伊马替尼的质量控制及代谢研究,该方法也为甲磺酸伊马替尼类似物的分离分析提供了一种新方法。3.制备了一种新型的MMC两性离子固定相,并进行了系统的色谱评价及应用研究。在亲水模式下,静电吸附力/排斥力、分配和氢键作用力为主要作用力,可分离一系列极性和离子型分析物。相比于反相液相色谱(reversed-phase liquid chromatography,RPLC),黄柏提取液在该色谱柱上能够得到更好的分离。结果表明,该色谱柱在复杂样品的分离中具有良好的分离性能。4.综述了CE在动物源性药物分析领域中的应用。