【摘 要】
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全文共两部分.第一部分,青霉素酰化酶G的纯化与部分酶学性质研究.该文主要研究经定点突变后的几种青霉素G酰化酶;为巨大芽孢杆菌来源、枯草杆菌表达.通过常规的发酵、分离与
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全文共两部分.第一部分,青霉素酰化酶G的纯化与部分酶学性质研究.该文主要研究经定点突变后的几种青霉素G酰化酶;为巨大芽孢杆菌来源、枯草杆菌表达.通过常规的发酵、分离与纯化工作,得到纯化达8-9倍的初步纯化的酶.并采用FPLC系统,以商业粗提用酶为样品,经凝胶过滤Sephacryl S-200柱与强阴离子交换柱Q<+>-Sepharose层析,得到提纯5倍,比活为50U/mg的青霉素酰化酶.比较研究蛋白质工程改造的青霉素酰化酶与野和型青霉素酰化酶的性质,发现突变的青霉素酰化酶与野生型青霉素酰化酶的催化常数基本接近,改变不大;双位点突变.酶D具有较高的热稳定性、有机溶剂稳定性,以及pH稳定性.第二部分,西洋山嵛菜(Cochlearia armoracia)过氧化物酶的纯化.该文主要是利用产自云南丽江的日本种属西洋山嵛菜,开发辣根以外来源的过氧化物酶.使用常规的硫酸铵沉淀与乙醇沉淀、硫酸锌纯化方法,加上阳离子、阴离子交换柱的色谱级纯化,得到电泳呈单一条带的西洋山嵛菜过氧化物酶.从结果分析看来,日本种属西洋山嵛菜主要含有至少3种的偏碱性过氧化物酶,但含量偏低.
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