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以家蝇(Musca domestica)成虫对采自广东省内三个不同生态区的36科55种植物材料甲醇粗提物进行了活性初筛。对山乌桕Sapium discolor等植物的杀虫、杀螺、抑菌、杀线活性进行了系统的测定。采用硅胶柱层析、反相柱层析、聚酰胺柱层析、凝胶柱色谱、重结晶和核磁共振技术等技术对山乌桕S.discolor的化学成分进行了分离和鉴定,测定了分离所得的化合物的抑菌活性。
对家蝇成虫的活性初筛中,10000μg/mL浓度下非洲桃花心木Swietenia mahagoni(叶和皮)以及乌桕Sapium sebiferum、石岩枫Mallotus repandus、山乌桕S.discolor、鸡眼藤Morinda parvifolia、扛板归Polygonum perfoliatum等表现较好的毒杀活性。处理48 h后,非洲桃花心木S.mahagoni(叶)致死率达到100%,80%以上的为乌桕S.sebiferum等7种植物提取物。
进一步的杀螺活性测定中,乌桕S.sebiferum对福寿螺Pomacea canaliculata的毒杀活性最好。以500μg/mL处理72 h后致死率达63.33%,山乌桕S.discolor其次。95%乙醇提取的杀螺效果稍优于甲醇提取。
深入的抑菌活性试验,苏铁Cycas revoluta、山乌桕S.discolor、乌桕S.sebiferum、肿足蕨Hypodematium crenatum甲醇粗提物在5000μg/mL浓度下对6种常见植物病原菌有抑制效果。苏铁C.revoluta总体抑菌效果最佳。山乌桕S.discolor甲醇粗提物对供试6种菌的香蕉枯萎菌F.oxysporum、玉米小斑菌Bipolaris maydis抑制效果最好。
由上确定山乌桕S.discolor为目标植物,深入研究其杀虫谱。其枝叶粗提物2000μg/mL浓度下对斜纹夜蛾Spodoptera litura、小菜蛾 Plutella xylostella3龄幼虫不产生毒杀作用;但对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus作用48 h后杀线活性达83.33%,毒杀效果优于树皮提取物。且杀线活性成分分布于石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物中,LC50值分别为103.77μg/mL、138.22μg/mL。
采用多种层析方法对山乌桕S.discolor的化学成分分析。共分离鉴定出15个化合物:3,3-二甲氧基鞣花酸(Ⅰ)、3,3,4-三甲氧基鞣花酸(Ⅱ)、3,3-二甲氧基鞣花酸-4-O-木糖苷(Ⅲ)、6-甲氧基7-羟基香豆素(Ⅳ)、6-羟基-7-甲氧基香豆素(Ⅴ)、6,7,8-三甲氧基香豆素(Ⅵ)、山柰酚(Ⅶ)、槲皮素(Ⅷ)、二氢槲皮素(Ⅸ)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅹ)、对羟基苯甲酸(Ⅺ)、蒲公英赛醇(Ⅻ)、莽草酸(ⅩⅢ)以及豆甾醇(ⅩⅣ)、β-胡萝卜苷(ⅩⅤ)。含黄酮醇及苷类4个、香豆素类3个和鞣花酸及苷3个和萜类等。化合物Ⅳ、Ⅶ~Ⅸ、Ⅺ~ⅩⅢ计8个为首次从该植物中分离得到。
将所分离的化合物以生长速率法作对立枯丝核菌Rhizoctorzia solani、香蕉枯萎菌F.oxysporum、辣椒炭疽菌Colletotrichum gloeosporiodies的抑制活性测定。15个化合物中,化合物6-甲氧基7-羟基香豆素(Ⅳ)对立枯丝核菌R.solani具有最好的抑制作用,100μg/mL浓度下作用48 h后对立枯丝核菌R.solani抑制效果超过40%。化合物槲皮素(Ⅷ)对香蕉枯萎菌F.oxysporum抑制效果明显优于其他化合物。50μg/mL浓度下山柰酚(Ⅶ)表现出最好的抑制效果。