透钙磷石复合材料修复动物骨缺损的初步实验研究

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目的:本实验通过制作透钙磷石检测其理化性能,作为复合材料植入动物骨缺损区,观察其对大段骨的成骨作用,探讨其作为骨修复材料修复骨缺损的可能性。方法:本实验主要分为材料制备及理化性能检测、动物体内植入骨缺损修复效果观察、聚乳酸-聚乙醇酸共聚体(PLGA)/重组骨形态蛋白-2(rhBMP-2)载药缓释微球的制备及理化性能检测。1.复合材料的制备与性能研究。将主要成分为:β-三磷酸钙(p-TCP)、一水磷酸二氢钙(MCPM)、三水磷酸氢镁按一定比例混合,加入固化液,常温下加工制备成透钙磷石(Brushite),检测复合材料固化时间、强度、pH、体外生物相容性、SEM扫描微观结构。2.在体研究新型复合材料动物体内修复骨缺损的能力。将健康成年新西兰大白兔32只随机分为A、B两组,均建立右侧桡骨骨缺损模型,A组动物骨缺损部位植入透钙磷石复合物,B组植入磷酸钙骨水泥(CPC)复合物,用影像学检测、组织学观察等检测等手段评估透钙磷石修复骨缺损的能力。3.采用复乳溶剂蒸发法,以PLGA为载体,制备包裹rhBMP-2的缓释微球,观察外观形貌、检测其载药率及观察体外释放规律。结果:1.透钙磷石的的强度平均值为20.4MPa,接近松质骨的强度;初凝时间为3.0~4.0min、终凝时间为10.0~12.0min,与已经商用的CPC材料相近,基本符合临床应用的要求;溶血实验提示其浸提液的溶血率<5%,对红细胞膜无毒害作用,未造成细胞膜的破坏而引起溶血,生物相容性好,SEM扫描照片示微观结构中存在大量50~150μm微孔。2.复合材料在体实验中,动物无中毒、溶血、过敏等不良反应,无一例死亡,具有良好生物相容性;X射线片示透钙磷石组与CPC组相比,4w时已显示差异,6w时进一步加快,至8w时基本降解完,而CPC无明显降解,组织切片示透钙磷石在6w时植入物两端与骨断断的交接处可见骨小梁,8w时有骨细胞基质、原始骨髓腔形成,与对照组CPC均具有促进成骨作用,但透钙磷石降解吸收过快,未完成骨缺损修复。3.采用复乳溶剂蒸发法制备rhBMP-2/PLGA制备缓释微球,球体形态圆整、平均直径80%在100-350μm,平均径粒为(250±54)μm,跨距=0.6,采用ELISA检测计算得微球的载药率为:0.52%±0.16%。体外释放24小时内速度较快,呈突释性增加,随后释放量速度减慢,第28天时达到47.3%±3.6%,体外释药规律符合Higuichi方程。结论透钙磷石降解速度过快,成骨效果并不明显,未完成骨缺损修复;采用复乳溶剂蒸发法制备rhBMP-2/PLGA缓释微球,外观形态较好,载药率、体外缓释效果较理想;在透钙磷石中加入成骨诱导因子是否有利于改善其成骨效果,有待进一步实验研究。
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