褪黑素对脂多糖诱导心肌肥厚的保护作用

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目的研究探讨褪黑素对脂多糖(LPS)诱导心肌肥厚的保护作用及机制。方法 (1)培养的心肌细胞分为五组:对照组、LPS组、LPS+褪黑素(1.5mg/L)组、LPS+褪黑素(3mg/L)组、LPS+褪黑素(6mg/L)组,在倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态学改变;(2)通过RC DCTM Protein Assay Kit检测各组心肌细胞蛋白水平。(3)通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组心肌细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)的分泌水平;(4)利用Realtime PCR和Western blot检测各组心肌细胞肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)基因和蛋白表达水平变化;(5)采用Ca2+探针Fura-2/AM在影像系统下记录各组心肌细胞Ca2+内流情况。(6)Western blot检测各组心肌细胞内CaN和CaMKⅡδB蛋白水平变化。结果 LPS能够诱导心肌肥厚、促进TNF-a的分泌和TNFR1的表达及增加Ca2+内流。在LPS诱导损伤之前预先给予不同浓度的褪黑素,能够减弱LPS诱导的心肌肥厚,降低心肌细胞TNF-a的分泌和TNFR1,Ca N和Ca MKⅡδB的表达和Ca2+内流,并且在浓度(1.5mg/L、3mg/L、6mg/L)范围内呈剂量依赖性。结论 在体外试验中褪黑素通过下调TNF-α和TNFR1的表达和维持Ca2+内稳态拮抗LPS诱导的心肌肥厚,发挥保护作用。
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