背景和目的食管癌(esophageal carcinoma)是世界上最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁人类的健康。食管癌的发生一般要经过不典型增生、原位癌、浸润癌、转移癌等阶段,且其起病隐匿,早期一般无症状,当症状明显时,大部分已进入中晚期。目前,不典型增生和原位癌可以完全治愈,早期癌治疗效果及预后也较好。而中晚期食管癌患者治疗手段局限,大部分患者发现时已不适合手术,5年生存率不足20%。因此,食管癌重在早期诊断。KLF家族中KLF9被认为是重要的肿瘤抑制基因,在多种肿瘤中起抑制癌症发生的作用,但是关于KLF9与食管癌及其癌前病变关系的研究较少。本课题主要研究KLF9在食管癌和癌前病变组织中的表达情况,探讨其与食管癌发生发展的关系,并就KLF9基因表达与食管癌相关性分析进行研究。材料和方法1、标本来源RTQ-PCR标本收集自2014年9月-2015年3月郑州大学第二附属医院胸外科新鲜标本40例,包括20例食管癌组织,20例对应的正常食管组织(至少距肿瘤边缘3cm),标本获取后冻存于-80°C超低温冰箱备用。免疫组化标本来自郑州大学第二附属医2012-2015年病理科存档蜡块60例,包括30例食管不典型增生,30例食管癌,对照组选取正常食管黏膜组织30例。所有标本均经病理学证实,术前未做任何放疗、化疗、生物治疗、免疫治疗及生物化学毒性。所有标本均有完整的临床病历资料。2、方法采用免疫组织化学法检测食管癌组织、食管不典型增生组织及正常食管组织中KLF9蛋白表达;采用荧光定量PCR(RTQ-PCR)法检测食管癌组织及配对正常组织中m RNA。3、统计学处理用SPSS 17.0软件进行统计学分析。免疫组化评分参考IRS评分法。统计KLF 9在正常食管组织、食管不典型增生及食管癌组织中的表达差异用四格表c2检验或校正c2检验。食管癌组织阳性表达与其临床参数间的差异用四格表c2检验或Fisher精确概率法。KLF9m RNA在正常食管与食管癌癌组织的关系采用相对定量Ct法分析数据。结果1、食管不典型增生和食管癌组织中,KLF9蛋白阳性主要表达于细胞核,表现为胞核呈黄色、棕色或棕褐色颗粒,而在正常食管组织,KLF9可表达于包浆、包膜和胞核。KLF9在正常食管组织、食管不典型增生、食管癌中的阳性表达率分别为90%(27/30)、80%(32/40)、45%(18/40),呈逐渐下降趋势;与正常食管组织相比,不典型增生组织的表达量明显降低(p=0.002)。与正常食管组织相比,食管癌组织的表达量明显降低(P<0.001)。KLF9蛋白在食管癌组织阳性表达与患者的性别、年龄、有无淋巴结转移无显著关联(P>0.05),与肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度和肿瘤大小之间均有明显的相关性(P<0.05)。2、KLF9m RNA的相对表达水平用2-ct法来计算,结果显示食管癌组织中KLF9 m RNA水平较正常食管组织明显下降,两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论1、KLF9蛋白和KLF9m RNA在食管癌组织中表达下调,提示其正常表达与食管癌的发生关系密切。2、KLF9蛋白在食管不典型增生中表达下调,提示KLF9表达下调的不典型增生可能更具癌变的倾向。3、KLF9在食管癌组织中表达与食管癌的大小、分化程度、浸润深度有关,提示KLF9的异常表达与食管癌的恶性发展有关。