大豆蚜是一种世界性的农业害虫,其造成的巨大经济损失使大豆蚜的防治成为急需解决的问题。吡虫啉因具有独特的作用特征,且对人体毒性极低,因此对大豆蚜具有极好的防治效果,但昆虫产生抗药性会降低防治效果。细胞色素P450是昆虫体内重要的解毒代谢酶,与昆虫对杀虫剂产生抗性有关。本研究从大豆蚜转录组数据库中获得12条可能与抗性相关的P450 CYP6基因c DNA序列,将基因序列克隆并进行分析,对其分子特性进行研究。通过大豆蚜对吡虫啉药剂的表达响应验证基因是否与抗性相关并筛选出主要抗性基因,再通过RNA干扰主要抗性基因对其功能进行进一步研究。本研究为大豆蚜抗药性的研究提供理论基础,为新型农药的研制提供思路。主要研究结果如下:（1）本研究获得12条大豆蚜细胞色素P450 CYP6家族的c DNA序列。经国际P450命名委员会命名为CYP6CY7、CYP6CY8、CYP6CY9、CYP6CY12、CYP6CY14、CYP6CY16、CYP6CY18、CYP6CY20、CYP6CY48、CYP6CZ1、CYP6DB1和CYP6DD1,已登录Gen Bank,登录号分别为MN055997、MN056000、MN055999、MN055998、MN056003、MN055995、MN056002、MG829856、MN055996、MN055993、MN056001和MN055994。长度分别为1735、1913、2071、1686、2468、1769、1556、2040、1639、1837、2287和2108 bp,分别包含长度为1554、1545、1569、1518、1542、1542、1527、1530、1536、1536、1542和1539 bp的开放阅读框,编码517、514、522、505、513、513、509、509、511、511、513和512个氨基酸,预测氨基酸的等电点分别为8.40、8.60、8.34、8.68、7.56、8.38、8.76、9.10、8.87、8.86、9.11和8.27,分子量分别为59.20、59.50、59.44、58.21、58.96、59.27、59.38、59.20、59.48、59.37、59.58和58.10 k Da。12条基因的氨基酸序列包括昆虫P450共有序列。进化分析表明12条基因的氨基酸序列均与同为半翅目蚜科昆虫的P450 CYP6基因的氨基酸首先聚类,符合昆虫细胞色素P450的分类特征,同时也符合形态学的分类特征。（2）LC₅₀浓度吡虫啉处理大豆蚜不同时间,12条基因的相对表达量在48 h内先后显著上调。当吡虫啉处理大豆蚜3、6、12和48 h时,分别有4、1、10和8条基因的相对表达量显著增加。其中CYP6CY7和CYP6CY48基因的相对表达量最高,CYP6CY7基因在12 h时的相对表达量为未诱导的3.55倍,CYP6CY48基因在48 h时的相对表达量为未诱导的3.36倍。表明这12条CYP6基因参与大豆蚜对吡虫啉的解毒代谢过程,主要抗性基因可能为CYP6CY7和CYP6CY48基因。（3）RNA干扰实验成功抑制了大豆蚜CYP6CY7和CYP6CY48基因的表达,并导致P450酶活力下降。RNA干扰CYP6CY7基因3、6和12 h时,基因相对表达量显著下调58.49%、73.80%和69.30%,干扰12和24 h时P450酶活力显著下降19.38%和21.96%。RNA干扰CYP6CY48基因1、2和3 h时基因相对表达量显著下调33.59%,25.60%和25.70%,干扰6、12和24 h时P450酶活力下降39.71%,32.79%和16.75%。（4）RNA干扰后,吡虫啉对大豆蚜的杀虫活性显著提高。RNA干扰大豆蚜CYP6CY7基因后24 h时大豆蚜对吡虫啉药剂处理的死亡率显著上升14.71%;RNA干扰大豆蚜CYP6CY48基因后12 h时大豆蚜对吡虫啉药剂处理死亡率显著上升13.13%。这表明该基因参与了大豆蚜对吡虫啉的解毒代谢过程。