论文部分内容阅读
人乳头瘤病毒(Human papillomavirus, HPV) 感染人的皮肤和粘膜上皮细胞,与上皮细胞的良性与恶性增生密切相关。HPV 的一些亚型可以引起皮肤疣、尖锐湿疣等良性增生性病变;而另一些亚型可以引起宫颈癌及其它生殖器肿瘤、皮肤肿瘤、口腔肿瘤等。由于缺乏特异的有效治疗手段,HPV 感染严重影响人类的健康,因此急需研制安全有效的疫苗。HPV目前尚不能在体外大量培养,难以研制传统疫苗。基因疫苗具有制备简单、免疫应答持久、安全稳定、可反复使用等优点,是一种有前途的新型疫苗。HPV16 的早期蛋白基因E7 是基因疫苗的理想靶抗原,研究表明HPV16 E7疫苗可以诱导动物产生特异性细胞免疫应答和体液免疫应答,保护小鼠不受HPV16 阳性肿瘤细胞的攻击,并且能抑制已经形成的肿瘤的生长甚至使肿瘤消退。但是当该疫苗应用于灵长目动物时,其免疫原性降低;在人体中应用该疫苗,其诱发的免疫应答更为减弱。而疫苗最终要应用于人体,因此必须进一步提高疫苗的免疫原性。研究发现某些细胞因子基因与基因疫苗共同注射, 可以提高基因疫苗的免疫效果。白细胞介素-15(Interleukin-15, IL-15)为一种最近发现的细胞因子,可以共享白细胞介素-2(Interleukin-2, IL-2)的受体和活性,例如激活T 细胞,特别是CD8+CTLs。除了具有IL-2 活性外,它还在NK 细胞的活化和其功能的调控中起关键作用。IL-15 基因已经在一些实验中被用作基因疫苗佐剂,取得了良好的促进抗原特异性免疫应答的效果。但是至今尚未见到IL-15 联合HPV16 E7 基因疫苗诱导免疫反应的报道,因此本实验构建了HPV16E7基因疫苗及亚克隆了IL-15 基因并构建了其真核表达质粒,将IL-15 表达质粒与HPV16 E7 基因疫苗共同注射于BALB/c 小鼠,并观察其对小鼠的特异性细胞免疫应答的影响。树突状细胞(Dendritic cell,DC)是体内功能最强的抗原递呈细胞,高表达MHC-Ⅰ,MHC-Ⅱ和共刺激分子,是当今免疫学研究的热点之一。目前对于DC 抗肿瘤免疫治疗的研究表明,DC 可激活抗原特异性T 细胞免疫