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目的心肌纤维化是心室重塑的重要病理基础,IL-17A参与心肌纤维化,但机制尚未阐明,EphrinB2信号通路参与肾脏的纤维化,但其是否在心肌纤维化中起作用还未见报道。我们的预实验发现IL-17A可以降低心脏成纤维细胞EphrinB2的表达,因此,本研究旨在观察IL-17A是否通过EphrinB2信号通路参与了心脏成纤维细胞的激活。方法应用酶消化及差速贴壁法分离培养新生小鼠原代心脏成纤维细胞,并应用vimentin、CD31、troponin TSM myosin抗体进行免疫荧光染色鉴定培养的心脏成纤维细胞。免疫荧光法用于检测心脏成纤维细胞EphrinB2的表达。实验分为对照组、慢病毒阴性组、慢病毒感染组,IL-17A组,慢病毒阴性对照+IL-17A组、慢病毒感染组+IL-17A组。用CCK8及划痕试验检测小鼠心脏成纤维细胞的增殖及迁移能力,实时荧光定量PCR (real-time PCR)及Western blot检测a-SMA、I、III型胶原的表达情况。各组实验均独立重复3次,实验数据以平均数±标准误(x+SE)表示,两组样本平均数比较时用t检验,多组数据间比较采用ANOVA(方差分析),应用SPSS19.0作统计分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果体外分离培养的小鼠心脏成纤维细胞经免疫荧光染色vimentin(+)、CD31(-)、 troponin T (-)、SM myosin (-),纯度在95%以上,且小鼠心脏成纤维细胞大量表达EphrinB2; IL-17A (100ng/ml)处理24h后,小鼠心脏成纤维细胞的增殖迁移能力、a-SMA的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成均较对照组显著降低。与此同时,EphrinB2表达也较对照组明显下降；慢病毒感染沉默EphrinB2基因后,心脏成纤维细胞的增殖迁移能力、a-SMA表达及胶原合成均较对照组显著降低,而EphrinB2基因过表达后结果则相反。EphrinB2基因沉默的心脏成纤维细胞IL-17A处理组即efnb2-shRNA+IL-17A与对照组即scramble+IL-17A组、control+IL-17A组相比,小鼠心脏成纤维细胞的增殖迁移能力、a-SMA的表达及Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成均进一步降低。而EphrinB2过表达的心脏成纤维细胞IL-17A处理组即lenti-efnb2+IL-17A与对照组vector+IL-17A、control+IL-17A相比,逆转了IL-17A对小鼠心脏成纤维细胞的抑制作用。结论IL-17A抑制体外培养的新生小鼠成纤维细胞的增殖迁移,同时减少了a-SMA的表达及胶原的合成,并提示IL-17A通过抑制EphrinB2信号通路而发挥作用。