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目的初步探讨不同缺氧时间刺激对神经细胞中外源性HSP70基因表达的影响及观察HSP70表达对神经元和胶质细胞缺氧再复氧损伤的保护作用。方法①采用重组腺病毒vAd-HSP70感染体外原代培养的神经细胞,检测靶细胞中外源性HSP70的表达。48h后给予感染细胞不同缺氧时间(缺氧Oh,0.5h,1h,2h,3h,4h)刺激,再复氧处理后,用RT-PCR和Western blotting检测重组腺病毒介导的HSP70基因在神经元和胶质细胞中的转录表达。②重组腺病毒vAd-HSP70感染体外培养的神经元和胶质细胞,vAd-HSP70感染组24h、48h、72h和vAd-GFP感染组的细胞经缺氧再复氧处理后,分别对细胞活力、细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力及线粒体和胞浆内细胞色素C进行检测分析。结果①重组腺病毒vAd-HSP70感染的神经细胞可检测到外源性HSP70基因的转录表达。②经缺氧再复氧处理后,随着缺氧时间延长,HSP70转录水平和蛋白表达都增加,缺氧1h时最高(1.1539±0.0315,0.9699±0.0023),其次是缺氧2h时(1.0398±0.0723,0.9622±0.0026),随后依次降低,缺氧4h组(0.7477±0.0328,0.9335±0.0034)HSP70表达最低,与其他各组比较有统计学意义(P<0.05)。③经缺氧再复氧处理后,vAd-HSP70感染组细胞活力较对照组明显增强(P<0.01);细胞培养上清中乳酸脱氢酶活力vAd-HSP70感染24h、48h和72h分别为1480±121,1023±106,1132±197,明显低于vAd-GFP感染组(1976±190,P<0.01)。实验各组线粒体中细胞色素C含量(0.9856±0.0121,1.0277±0.0073,1.0136±0.0078)高于对照组(0.9695±0.0031,P<0.05),而胞浆中的含量(0.9868±0.0076,0.9600±0.0049,0.9645±0.0028)低于对照组(1.0109±0.0049,P<0.01),以作用48h最为理想。结论①缺氧2h内给予神经细胞再复氧处理外源性HSP70表达水平较高,有利于神经细胞功能的恢复。②腺病毒介导的外源性HSP70表达可保护神经元和胶质细胞抵抗缺氧再复氧损伤,具有明确的细胞保护作用。