甘油二酯作为一类功能性油脂,可减少内脏脂肪的积累、控制体重、降低血脂等功效。甘油二酯的这些作用而受到各行各业的青睐。在中国市场上,至今没有甘油二酯食用油的生产和销售,具有重大发展潜力。酶法制备甘油二酯针对化学法具有的优势为:反应体系条件比较温和、酶具有高度选择性、生产产品纯度比较高、能耗低等。以大豆油为原料,生产高甘油二酯含量的大豆油,不但可以满足对于原料营养成分的要求,而且由于原料来源丰富,可以实现产业化。本课题以东北丰富的大豆油为原料,利用脂肪酶催化水解甘油三酯合成甘油二酯,在无溶剂体系中,考察水解时间、水解温度、加酶量、加水量、PH以及甘油摩尔比对酶解反应产物甘油二酯含量的影响,然后通过单因素响应面法优化工艺条件,采用气质联用仪测定甘油二酯含量(主要成分:油酸甘油二酯及亚油酸甘油二酯)。最佳工艺条件分别为:(1)磷脂酶A1:加水量为25mL、水解温度为40℃、加酶量为700 uL、反应时间12 h。获得大豆油中甘油二酯含量为16.3%。(2)脂肪酶TLIM:反应摩尔比(大豆油:甘油)5:1,加酶量2.0g,温度50℃,反应时间16h。获得大豆油中甘油二酯含量为17.04%。(3)脂肪酶RMIM:反应摩尔比(大豆油:甘油)5:1,加酶量3.0g,温度55℃,反应时间16h。获得大豆油中甘油二酯含量为18.88%。(4)脂肪酶435:反应摩尔比5:1,加酶量3.0g,温度50℃,反应时间12h。获得大豆油中甘油二酯含量为17.85%。利用分子蒸馏法对产品进行纯化,考察了蒸馏温度、蒸馏真空度及蒸馏刮板速度对大豆油中甘油二酯含量的影响,通过正交试验法,采用气质联用仪测定甘油二酯含量。最终的最佳工艺:温度130℃,真空度1.0mbar,刮板速度600r/min。经三级蒸馏后甘油二酯含量均达40%以上。