近年来,多肽类药物在抗肿瘤治疗研究中显示出良好的效果及巨大的潜力,其显著的抗肿瘤作用、低免疫原性和低毒性等特点使之成为生物医药领域的研究热点。蜂毒素（Melittin）是蜂毒（Venom）中的主要活性物质,是一个由26个氨基酸组成的多肽分子,在生理条件下带有6个正电荷。蜂毒素本身具有很强的药理活性,如可通过破坏细胞线粒体膜,参与抗肿瘤免疫应答或通过如作用于caspase途径、Bcl-2和Ba X蛋白表达等诱导肿瘤细胞的凋亡,在黑色素瘤、肝癌、肺癌、乳腺癌等肿瘤治疗研究中均显示有很好的功效及非常大的潜力。但蜂毒素在发展和用于肿瘤等疾病的临床治疗中还存在许多问题,如:蜂毒素分子本身特殊的α-螺旋结构使其与磷脂膜具有很强的亲和力,极易插入脂质双分子膜并在细胞膜上致孔,因此游离的蜂毒素具有很强的溶血效应和组织毒性,而这种溶血副作用和组织毒性是其走向临床的最主要障碍之一;另外,蜂毒素作为一种多肽药物,在给药后极易在循环系统或组织中被降解代谢,或因所带电荷被其他蛋白或分子等吸附结合,从而导致其低生物利用度及潜在的生物学毒性等。基于蜂毒素在肿瘤治疗方面的潜力及上述存在的问题,我们根据蜂毒素的理化性质发展了一种新型的蜂毒素脂质体纳米制剂。我们首先选择了一种可生物降解的阴离子聚合物材料:γ-聚谷氨酸,与蜂毒素混合孵育,通过二者之间正负电荷相互作用制备得到表面电势为负的蜂毒素/聚谷氨酸纳米颗粒（Mp G@NPs）。随后将该纳米颗粒与阳离子脂质体按一定比例混合孵育,通过电荷作用驱动的脂质自组装得到内核为蜂毒素/聚谷氨酸纳米颗粒,外面为脂质双分子膜的蜂毒素脂质体纳米制剂（Mp G@LNPs）,并进一步通过后插DSPE-PEG2000-RGD得到靶向性制剂RGD-Mp G@LNPs。利用动态光散射、扫描透射电镜等技术对该制剂的形貌、理化性质等进行了系统的表征,通过基于蜂毒素脂质体纳米制剂的理化性质,包封率和稳定性等对制剂的处方和制备工艺进行了优化。进一步的,我们评价了该制剂的溶血作用及对肿瘤细胞A549的结合﹑毒性和凋亡诱导能力。最后,我们利用A549荷瘤小鼠模型评价了该制剂的抗肿瘤治疗效果,并通过给药后小鼠的生理生化指标考察了该制剂的毒性。结果显示,我们获得了粒径约83 nm,表面电势为-32.5 m V的蜂毒素/聚谷氨酸纳米颗粒,该纳米颗粒的蜂毒素包封率为88.09%;之后,通过在外层包裹磷脂双分子层,获得了粒径大小在104.7 nm左右,表面电势为9.14 m V的蜂毒素/聚谷氨酸脂质体纳米制剂,其蜂毒素的包封率为72.13%。该制剂在HEPES缓冲液、无血清培养基﹑5%葡萄糖溶液﹑PBS及生理盐水中均保持稳定。溶血实验和细胞毒性实验证明,与游离蜂毒素相比,Mp G@LNPs基本没有溶血作用和明显的细胞毒性。而RGD的修饰可以提高Mp G@LNPs的细胞结合特异性和效率,并提高制剂的细胞毒性,而且能够明显诱导靶细胞的凋亡。之后的动物试验证明该制剂能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,而小鼠生理生化指标均无异常,体重与对照组相比也没有显著性差异。综上所述,我们发展了一种新型的蜂毒素脂质体纳米制剂,该制剂可以很好的载荷蜂毒素并具有理想的理化性质,有效的解决了蜂毒素在临床应用中所面临的严重溶血和毒副作用等问题,而细胞和动物实验都证明该蜂毒素脂质体纳米制剂具有很好的抗肿瘤治疗效果。这些研究和相关结果证实了蜂毒素脂质体纳米制剂的抗肿瘤治疗潜力,也为蜂毒素的临床抗肿瘤治疗应用提供了保障,并为类似的正电性多肽药物的制剂开发提供了参考。