论文部分内容阅读
第一部分 TNF-α仅诱导SD大鼠胰岛细胞凋亡的研究 目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导体外SD大鼠胰岛细胞凋亡及Bcl-2和BaxmRNA表达水平的影响。 方法 成年雄性SD大鼠胰腺经胶原酶P消化，Ficoll400纯化后获得胰岛，在37℃，5％CO-2，RPMI 1640培养液培养7天，铺成单层，用不同浓度TNF-α(分别为0、10、30、50ng／mL)继续孵育24小时。应用脱氧核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测胰岛细胞凋亡率；应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰岛细胞Bcl-2和BaxmRNA表达水平的变化。 结果 10ng／mLTNF-α组胰岛细胞凋亡数与对照组比较无显著差异(P＞0.05)，30ng／mL和50ng／mLTNF-α组胰岛细胞凋亡数与对照组比较显著增加(P＜0.05)。10ng／mLTNF-α能增加Bcl-2 mRNA表达水平，而30ng／mL和50ng／mLTNF-α能显著降低Bcl-2mRNA表达水平。10ng／mL、30ng／mL及50ng／mLTNF-α均能使BaxmRNA表达水平增加。 结论 (1)TNF-α可呈浓度依赖性诱导体外培养的胰岛细胞凋亡。 (2)30ng／mL和50ng／mLTNF-α能降低胰岛细胞Bcl-2mRNA表达水平。10ng／mL、30ng／mL和50ng／mLTNF-α均能使BaxmRNA表达水平增加。TNF-α诱导胰岛细胞凋亡可能与胰岛细胞Bcl-2 mRNA表达水平降低以及BaxmRNA表达