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镉(Cd)是动物、植物生长非必需元素,环境中的Cd会进入生物体内,通过生物富集作用危害食物链中各级生物生长发育,最终对人体造成危害。Cd会通过大气、水、土壤等环境与植物发生直接接触,经过叶片直接接触和根际吸收等方式进入植物体内,扰乱植物正常的生理条件。Cd会诱导活性氧(ROS)的爆发,造成植物营养成分的吸收失衡,并破坏脂质膜和植物的光合作用过程,导致叶绿体结构的发生变化,降低光合速率降低。重金属会破坏细胞的细胞膜和蛋白质的结构,使植物生长发育受到抑制。现有研究证实气体信号分子H2S会通过调节植物抗氧化系统或者增强光合作用来加强对重金属的抗性。但是H2S在缓解菘蓝重金属Cd胁迫中的作用机制尚不明确。本课题以菘蓝为研究对象,在Cd胁迫处理的同时加入H2S外源供体NaHS,探究在Cd的胁迫下NaHS对菘蓝幼苗生长生理指标,细胞壁成分,Cd在菘蓝幼苗体内的分布及靛蓝和靛玉红合成前体MEP和MVA途径上发挥重要作用的相关酶合成基因表达的影响。从植物生长、抗氧化系统及Cd在幼苗体内的富集情况,及细胞壁在阻隔Cd进入细胞质中的关键作用上分别阐明H2S在菘蓝幼苗应对Cd胁迫中的作用,得到的主要研究结论如下:(1)H2S处理下菘蓝幼苗应对Cd胁迫的防御机制。结果表明Cd胁迫会激活菘蓝幼苗的抗氧化系统,幼苗体内抗氧化酶活性及GSH含量上升,幼苗根尖的ROS爆发均是菘蓝幼苗应对Cd胁迫的机制。外源H2S的添加通过增强幼苗体内各类氧化酶的活性及GSH的含量提升植物的抗氧化能力,降低植物细胞内ROS的积累,最终缓解Cd对幼苗造成的氧化损伤。因此,推测H2S通过提高菘蓝幼苗的抗氧化水平来缓解由于重金属胁迫导致的幼苗生长受阻,促进了 Cd胁迫下菘蓝幼苗的生长。(2)H2S提升菘蓝幼苗响应Cd胁迫的耐性机制。结果表明,菘蓝幼苗叶和根中Cd的含量、幼苗叶和根亚细胞各组分中Cd的含量及幼苗叶和根细胞壁基本多糖组分中Cd的含量均随着Cd处理浓度的增加而增加。不同浓度Cd胁迫下,H2S处理能显著降低地上组织中Cd的含量,富集幼苗根中Cd的含量,降低Cd在幼苗体内的转运速率。与不同浓度Cd处理相比,地上组织中Cd含量分别显著性降低50.89%、46.74%、43.24%,根中Cd含量分别显著性增加34.30%、25.69%、29.48%,同时幼苗体内Cd的转运系数分别显著性降低63.49%、60.50%、45.53%;同时,H2S能提高幼苗叶和根细胞壁对Cd的富集能力,通过减少进入幼苗细胞内Cd的含量,最终降低Cd对幼苗的毒害。Cd胁迫显著降低幼苗细胞壁中葡萄糖的含量,影响细胞纤维素的合成。外源添加H2S缓解由于Cd胁迫导致的细胞壁中葡萄糖降低,减弱Cd胁迫对幼苗细胞壁纤维素合成造成的影响。最终提升菘蓝幼苗细胞壁中纤维素的含量,以增强幼苗细胞壁对Cd的结合能力,提高菘蓝对Cd的耐受性。因此,H2S通过增加幼苗细胞壁中纤维素的含量,增强幼苗细胞壁对Cd的固定和富集,从而降低由于Cd进入细胞所导致的对菘蓝幼苗的毒害。(3)不同浓度的Cd处理对BcSK,BcDXR,BcASA1,BcASA2,BcASB基因主要表现出上调的作用,Cd处理会诱导菘蓝体内相关基因的表达,影响相关代谢产物的合成。H2S处理会显著上调低浓度Cd处理下(0.5 mg/L Cd、1.5 mg/L Cd)幼苗中BcSK,BcDXR,BcASA1,BcASA2,BcASB基因的相对表达量,2.5 mg/L Cd处理下各个基因的相对表达情况并不一致,而H2S处理对叶片中BcASB基因的作用表现出显著的下调作用。