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研究目的卵巢癌是死亡率最高的女性生殖系统恶性肿瘤,发病隐匿,其发病率和死亡率近年来有逐渐上升的趋势。由于缺乏特异性症状及有效的检查手段,大多数患者诊断时已处于卵巢癌晚期,且常已发生盆腹腔转移,给治疗带来很大的困难。尽管近年来手术和化疗药物都有所改进,但晚期卵巢癌患者的5年生存率仍然非常低。因此,探索卵巢癌的早期诊断方法和新的治疗靶点是当前研究的热点。N-糖基化是蛋白质翻译后修饰最常见的方式之一,与肿瘤细胞的各种生物学功能息息相关。N-糖基化的进程由多种不同的糖基转移酶催化,其中研究最多的是N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V(Gn T-V)。研究发现Gn T-V在许多肿瘤的增殖、侵袭和转移中发挥重要的作用,但其在卵巢癌中的功能尚不明确。本研究主要探讨Gn T-V对卵巢癌细胞系A2780和SKOV3的增殖、迁移及侵袭等生物学行为的影响,并初步探讨其作用机制,为卵巢癌的早期诊断与治疗靶点研究提供理论依据。研究方法分别构建干扰与过表达Gn T-V的慢病毒载体,转染卵巢癌细胞系A2780和SKOV3,转染成功后通过RT-PCR技术检测病毒干扰/过表达效率,并通过细胞增殖实验(CCK-8法)、细胞划痕实验、Transwell实验及流式细胞术来观察Gn T-V的干扰/过表达对卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭等生物学行为的影响。利用Western blot检测Gn T-V的干扰/过表达后卵巢癌细胞内E-cadherin、laminin、MMP-2和MMP-9等蛋白的变化,初步探讨Gn T-V影响卵巢癌细胞生物学行为的作用机制。研究结果用慢病毒干扰了Gn T-V的表达后,RT-PCR结果显示A2780和SKOV3细胞内Gn T-V的表达明显下降,CCK-8法检测发现A2780和SKOV3细胞的增殖能力增强,划痕实验发现A2780和SKOV3细胞的迁移能力增强,Transwell实验发现A2780和SKOV3细胞的侵袭能力增强,流式细胞术发现A2780和SKOV3细胞的细胞周期得到促进,Western blot结果显示Gn T-V的表达降低后,A2780和SKOV3细胞内的E-cadherin的表达水平下降,而MMP-2及MMP-9的表达增加。反之,过表达Gn T-V后,A2780和SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力都明显减弱,同时细胞内的E-cadherin的表达水平增强,laminin、MMP-2及MMP-9的表达下降。结论卵巢癌细胞中Gn T-V的表达能抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其生物学功能可能与上调E-cadherin的表达及下调laminin、MMP-2与MMP-9的表达有关。