独活寄生汤含药血清对体外培养成骨细胞OPG/RANKL基因表达的影响

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研究目的检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞OPG/RANKL基因表达的影响,从分子生物学层面探究独活寄生汤治疗骨质疏松症的机理,为独活寄生汤治疗骨质疏松症提供理论及实验依据。研究方法体外原代培养SD乳大鼠成骨细胞,分别用生理盐水血清对照组、独活寄生汤含药血清低浓度、中浓度及高浓度作用于成骨细胞,采用MTT法检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞生长的影响,采用碱性磷酸酶(ALP)检测成骨细胞活性,并通过RT-PCR及Western Blot法检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞OPG、RANKL基因表达的影响。研究结果独活寄生汤含药血清以浓度及时间的依赖方式促进成骨细胞生长;并能促进成骨细胞内碱性磷酸酶的活性;RT-PCR结果显示不同浓度的独活寄生汤含药血清能促进OPGmRNA的表达,并且抑制成骨细胞RANKLmRNA的表达;Western Blot结果显示不同浓度的独活寄生汤含药血清能促进成骨细胞OPG蛋白的表达,并且抑制成骨细胞RANKL蛋白的表达。研究结论独活寄生汤含药血清可以促进成骨细胞的增值以及OPG的表达,同时抑制RANKL分泌,不但阻碍破骨细胞的成熟及分化,降低破骨细胞活性,同时促进破骨细胞的凋亡,抑制骨吸收。独活寄生汤通过OPG、RANKL系统能够促进成骨细胞的增殖增加骨量,抑制破骨细胞的成熟,减少骨吸收,从而达到治疗骨质疏松的目的。
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