【摘 要】
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背景介绍:人核糖核酸酶抑制因子[1](Human Ribonuclease Inhibitor,hRI)是广泛存在于哺乳动物细胞浆中的一种酸性糖蛋白,分子量为50kD[2], 其基因位于染色体 11p15.5,三级结
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背景介绍:人核糖核酸酶抑制因子[1](Human Ribonuclease Inhibitor,hRI)是广泛存在于哺乳动物细胞浆中的一种酸性糖蛋白,分子量为50kD[2], 其基因位于染色体 11p15.5,三级结构呈对称的马蹄型。hRI包含 15 个亮氨酸重复序列(Leucine-rich repeat, LRP)[3],而且一分子的 hRI 含有 32 个高度保守的半胱氨酸残基,其中至少 30 个半胱氨酸的巯基以还原型巯基的形式存在,还原型巯基是保持 RI 正常生物学活性所必需的。生物体内的还原性谷胱甘肽(GSH)通过其巯基可清除过氧化氢,防止脂质过氧化物造成的损害,在机体抗过氧化损伤方面发挥了重要作用。我们实验室在关于 hRI 的抗氧化能力方面已经进行了部分体外实验,在细胞水平证实能够过表达 hRI 的大鼠神经胶质瘤C6 细胞在过氧化氢(H2O2)损伤时,不仅在细胞形态,而且在 LDH漏出水平,MDA 和 GSH 含量方面都较对照组表现了较强的抗氧化损伤的能力[4]。因此,我们推测 hRI 在提高机体抗氧化损伤方面具有一定的潜力。 目的:从组织中提取的该蛋白产量较少,成本高,不宜大批量生产,所以本室一直研究其基因工程生产的方法。探索最优条件下融合蛋白 GST-hRI 的可溶性表达。 方法:构建了 pGEX-6p-1-hRI 融合型表达质粒。将 hRI cDNA 插
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