鸦葱(Scorzonera austriaca Willd)为菊科鸦葱属,多年生草本植物,是一种传统藏药。在国内主要分布于东北、华北以及西北部分地区,例如吉林,陕西,宁夏等地。多用于治疗疮痈肿,乳腺炎等。相关药理实验表明,鸦葱的黄酮提取物具有保肝活性,而其中的新黄酮咖啡酰类衍生物很有可能为鸦葱保肝的活性基础,因此,对鸦葱中黄酮咖啡酰类衍生物的分离、富集有很大必要性。本实验以鸦葱为原料,对黄酮咖啡酰衍生物进行含量测定,并用大孔树脂对目标化合物进行分离、富集及工艺参数的确定。由此完善了鸦葱质量控制的相关内容,也为其抗肝炎病毒的药理活性研究提供一定基础。研究成果如下:1.对鸦葱中黄酮咖啡酰类化学成分进行提取分离。取鸦葱干燥全草15kg,70%乙醇冷浸,提取液减压回收乙醇,水层经D101型大孔树脂柱吸附,以60%乙醇洗脱并收集洗脱液,减压回收乙醇,干燥,得鸦葱粗黄酮提取物325g。通过硅胶柱色谱、ODS柱色谱等分离纯化手段,得到2个黄酮咖啡酰类衍生物:木犀草素8-C-(6"-O-咖啡酰基-β-D吡喃葡萄糖苷),芹菜素8-C-(6"-O-咖啡酰基-β-D吡喃葡萄糖苷)。2.建立鸦葱中黄酮咖啡酰类衍生物含量测定方法。以木犀草素8-C-(6"-O-咖啡酰基-β-D吡喃葡萄糖苷)为对照品,采用HPLC法分析等梯度浓度的对照品,检测波长337nm,记录峰面积,建立回归方程,用于测定总黄酮中咖啡酰衍生物的含量。3.大孔树脂的筛选。通过动态分离、静态试验、吸附及解析性能等发现Hp20型大孔树脂对鸦葱黄酮咖啡酰类衍生物具有较好的富集效果,故选定Hp20型树脂进行纯化工艺试验。4.Hp20大孔树脂洗脱工艺参数确定。结果:上样液流速相同时,浓度相对较大的鸦葱总黄酮溶液吸附速率较快,空白树脂与上样树脂的质量比不小于2:1,先以30%乙醇除去非目标化合物,再用50%乙醇洗脱液以2BV·h-1的速度洗脱效果较好,经过检测,样品中黄酮咖啡酰衍生物含量超过90%。