【摘 要】
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盐藻(Dunaliella)是一种对多种环境胁迫有极强抗性的无细胞壁单细胞真核绿藻,适合于用来研究植物对各种胁迫的反应机制.该实验室已成功分离到盐藻细胞周质碳酸酐酶基因DSCA,N
【出 处】
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中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院
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盐藻(Dunaliella)是一种对多种环境胁迫有极强抗性的无细胞壁单细胞真核绿藻,适合于用来研究植物对各种胁迫的反应机制.该实验室已成功分离到盐藻细胞周质碳酸酐酶基因DSCA,Northern blot研究表明该基因受高盐胁迫所诱导.以此为基础,该论文用Northern blot的方法进一步证明,DSCA基因的表达也受碳饥饿胁迫诱导,从而推测该基因受盐胁迫诱导表达可能还与盐胁迫引起的培养液中CO<,2>溶解度降低密切相关.为进一步研究该基因的生理功能,用玻璃珠法将盐藻DSCA基因转化入莱茵衣藻.通过Southernblot检测,表明盐藻DSCA基因已经整合到莱茵衣藻基因组.酶活测定显示,转化子在培养液中的CA酶活力明显高于细胞内的酶活力,这可能是由于用于转化的衣藻细胞株cc849、cc406其细胞壁缺失,致使DSCA酶蛋白被泄漏到培养液中.在高盐环境中,DSCA转化子细胞有较高CA活力;但转化子与未转化衣藻相比,细胞的生长速率和光合放氧速率改变不大.另外,用该实验室构建的盐藻差减杂交(SSH)片段作探针,从盐藻cDNA文库中分离得到了一个与盐胁迫相关的葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)cDNA.初步的序列分析显示该cDNA的5端有一独特的碱性氨基酸引导区域.Northern blot分析证明它的表达是受盐诱导的.
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