多氯联苯126对苯并(a)芘致HepG2细胞氧化应激及DNA损伤的影响

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目的:苯并[a]芘(benzo(a)pyrene,B(a)P)作为多环芳烃的代表,广泛存在于各种环境介质中,具有很强的致癌性。多氯联苯是目前国际上极为关注的一类持久性有机污染物,多氯联苯126(3,3’,4,4’,5-pentachlorobipheny,PCB126)作为具有共面结构的多氯联苯同系物代表,是毒性最强的多氯联苯之一,在环境和人体中均可检测到。有研究表明B(a)P的代谢活化可引起细胞氧化应激,而多氯联苯能增强B(a)P的代谢活化,从而可能加重其氧化应激程度,进而引起细胞的遗传损伤,并且两者常共存于多种环境介质和人体生物样本中,研究两者联合作用时氧化应激效应及遗传毒性效应具有现实意义。方法:本文以HepG2细胞为靶细胞,设0.01、0.1、1和10nmol/L PCB126剂量组和B(a)P 50μmol/ L剂量组,以10 ml/L二甲基亚砜(DMSO)为溶剂对照组,进行各物质的单独染毒。同时用不同浓度PCB126预处理HepG2细胞后,再与B(a)P联合染毒。通过流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;通过TNB法检测细胞内谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)含量;通过硫代巴比妥酸法检测细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;并通过单细胞凝胶电泳试验检测DNA损伤,以此探讨PCB126对B(a)P致HepG2细胞氧化应激及遗传损伤的影响。结果:与溶剂对照相比,PCB126单独染毒时,仅在最高浓度(10.0nmol/L)引起ROS增加(P<0.05)。与B(a)P单独作用相比,PCB126各剂量与50μmol/L B(a)P联合染毒,ROS均显著增加(P<0.01),其中0.01、0.10、1.00nmol/L PCB126与B(a)P联合染毒时诱发的ROS增加存在剂量依赖关系,ROS的增加在10.0nmol/L PCB126与B(a)P联合染毒时有所下降。与溶剂对照相比,50μmol/L B(a)P单独染毒可引起HepG2细胞GSH明显增加(P<0.01),而各剂量PCB126单独染毒时GSH均显著减少(P< 0.01)。与B(a)P单独作用相比,各联合作用组GSH均显著减少(P<0.01)。与溶剂对照相比,50μmol/L B(a)P单独染毒可引起HepG2细胞MDA显著增加(P<0. 01)。与B(a)P单独作用相比,仅在最高浓度10.0nmol/L PCB126与B(a)P联合染毒时MDA显著增加(P<0.05)。与溶剂对照相比,50μmol/L B(a)P单独染毒可引起DNA损伤显著升高(P<0.01)。与B(a)P单独作用相比,1.00、10.0nmol/L PCB126与B(a)P联合染毒时DNA损伤显著增加(P <0.05)。结论:综上所述,一定剂量的PCB126能使B(a)P诱导的HepG2氧化应激加重,细胞遗传损伤增强,提示PCB126对B(a)P遗传毒性的增强可能与其诱导的氧化应激有关。
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